黄小强，王慧，葛阳春，诸婷婷，王远志，陈创夫，杜军伟

（1石河子大学生命科学学院，石河子832003；2新疆地方与民族高发病教育部重点实验室／石河子大学医学院，石河子832000；3石河子大学动物科技学院，石河子832000）

布鲁氏菌病（Brucellosis）是由布鲁氏菌引起的一种人畜共患传染病［1］，人感染后常表现为持续性感染，造成多系统的损害，牛、羊感染后易造成流产［2］，给人类健康和畜牧业发展造成了极大的危害。

布鲁氏菌是胞内寄生性病原，形成膜结合室，从而避免溶酶体的裂解，有利于细菌的胞内繁殖，在侵染巨噬细胞过程中，由于壁膜蛋白最先与宿主细胞发生相互作用，完成细菌侵入机体的黏附过程。omp31是布鲁氏菌高度保守的特异性蛋白［3］，在维持细菌外膜结构稳定性及中发挥着重要作用［4］，而且其是公认的毒力因子［5］，与布鲁氏菌的胞内生存、繁殖有直接关系。目前很多国内外学者对omp31进行研究，Cassataro等［6］利用omp31基因构建的DNA疫苗，可诱导小鼠免疫作用，在攻毒时具有一定的保护力。Jacques等［7］对omp31进行缺失，证实了外膜蛋白OMP31缺失，布鲁氏菌胞内生存能力下降，为研究新型疫苗提供了依据。

本研究将布鲁氏菌表面蛋白OMP31连接与携带有绿色荧光蛋白基因载体中，实施共表达，共同转染巨噬细胞，观察布鲁氏菌表面蛋白在巨噬细胞中的表达情况，旨在为进一步揭示布鲁氏菌胞内寄生的分子机理奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1实验材料及主要仪器

绵羊种布鲁氏菌019株由本实验室保存；质粒pTY（携带有增强型绿色荧光蛋白基因）由南方医科大学微生物与免疫教研室提供；……