亓 龙， 左 娣， 王 辉， 李晓涛

（1.上海交通大学医学院附属新华医院 核医学科，上海 200092；2.华东师范大学 生命医学研究所，上海 200241）

0 引 言

REGgamma（即REGγ，或PSME3，或11Sγ，或PA28γ）是蛋白酶体调节因子，有研究表明REGγ在未分化甲状腺癌中高表达［1］，而p53，BRAF的突变并高表达和甲状腺癌远处转移是预后不佳的主要表现［2，3］.NOTCH1是NOTCH 信号通路中NOTCH 家族的4个主要蛋白之一，其与肿瘤细胞的增殖、侵袭及转移有密切的关系［4］.近年来在分化型乳头状甲状腺癌（PTC）中检测出BRAF 基因突变，且逐渐成为研究热点［5］.目前REGγ，p53，NOTCH1和BRAF之间的相关性报道尚未发现.本文通过对2009年1月至2011年7月间的40例乳头状甲状腺癌患者的临床资料和术后病理，结合REGγ，p53，NOTCH1和BRAF表达的研究，分析它们之间的相关性及其临床意义.

1 材料和方法

1.1 一般资料 乳头状甲状腺癌及乳头状甲状腺癌伴淋巴结转移患者40例，患者均采用甲状腺叶全切除＋峡部切除＋部分淋巴结切除术并经病理明确诊断，无其他原发性恶性肿瘤，术前未经放疗及化学药物治疗，且知情同意.

1.2 主要试剂 18S，REGγ，p53，NOTCH1和BRAF引物均由invitrogen公司合成，兔抗人REGγ多克隆抗体（Invitrogen公司）、鼠抗人p53、BRAF单克隆抗体及山羊抗人NOTCH1单克隆抗体和鼠抗兔、兔抗鼠及兔抗山羊二抗（Santa Cruz公司），妙通免疫组化试剂盒（上海妙通生物公司）均由华东师范大学生命医学研究所李晓涛教授实验室惠赠.

1.3 Realtime－PCR 总RNA的提取与逆转录Realtime－PCR分别对甲状腺癌组织按照Trizol（TaKaRa公司）说明书提取组织总RNA.分别取3μg总RNA用RevertAidTM逆转录试剂盒（Invitrogen公司）进行逆转录.用Sybgreen试剂盒（Toyobo公司）和Realtime—PCR仪（Agilent Technologies公司）进行扩增.引物序列如表1所示.扩增程序：95℃，5min；……