双酶传感器对大鼠血清与腹腔巨噬细胞内葡萄糖和胆固醇的同时检测
2012-10-19黄齐林安雅睿江小丽毕文姬金利通
化学传感器 2012年1期
黄齐林,安雅睿,江小丽,陈 华,毕文姬,张 文*,金利通
(1.华东师范大学化学系,上海200062)
(2.玉溪师范学院化学系,云南玉溪653100)
动脉粥样硬化是一种慢性炎症病变,病理学研究发现巨噬细胞内胆固醇沉积形成粥样斑块可引发血管管腔变细[1~2]。数据表明,动脉粥样硬化是糖尿病患者发病和死亡的主要原因,超过65%的糖尿病患者死于动脉粥样硬化及其并发症[3]。研究发现,大鼠巨噬细胞内胆固醇含量随着葡萄糖含量的增加而升高,且巨噬细胞内胆固醇的大量沉积是动脉粥样硬化的主要病因[4~5]。为了探究高血糖和胆固醇在糖尿病引发动脉粥样硬化过程中的作用,有必要建立同时检测大鼠血清和腹腔巨噬细胞内葡萄糖和胆固醇含量的有效实验方法。
该文研制了一种新型双酶生物传感器,用于大鼠血清与腹腔巨噬细胞(PMs)内葡萄糖和胆固醇的同时检测。首先在双电极表面电聚合硫堇;然后将金纳米粒子固定在聚硫堇(PTH)表面,吸附金纳米粒子的聚硫堇不仅能够保持酶的催化活性,而且可作为介电中心提高电子转移速率;最后用壳聚糖做交联剂将葡萄糖氧化酶(GOD)、胆固醇酯酶(ChE)和胆固醇氧化酶(ChOx)分别共价键合在双电极的聚硫堇层上。通过检测双电极上的氧化电流大小即可间接检测到葡萄糖和胆固醇的浓度。葡萄糖传感器的线性范围为8.0×10-6~6.0×10-3mol/L, 检 测 限 为 2.0×10-6mol/L;胆固醇传感器的线性范围为2.0×10-6~1.0×10-3mol/L,检测限为 0.6×10-6mol/L。 结果显示该双酶传感器灵敏度高,选择性好。该传感器成功用于同时检测糖尿病大鼠血清及腹腔巨噬细胞内的葡萄糖和胆固醇的含量,取得令人满意的结果。……
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