miR-127和miR-136在转基因克隆绵羊胎盘中的表达分析及其靶基因的鉴定
2012-10-17胡圣伟陈创夫赛务加甫务热力哈孜郭吉星
胡圣伟,倪 伟,陈创夫,赛务加甫,务热力·哈孜,郭吉星
(1.石河子大学 动物科技学院,新疆 石河子 832000;2.石河子大学 生命科学学院,新疆 石河子 832000)
目前,通过体细胞核移植技术己经成功培 育 出 绵 羊[1]、牛[2]、山 羊[3]、猪[4]、大鼠[5]、骡子[6]和狗[7]等多种哺乳动物,尤其是在利用该技术成功获得具有一定性状的转基因克隆绵羊、牛和猪后,显示出这一技术诱人的应用前景。但是,体细胞克隆动物在孕期流产率较高,只有少数能发育到妊娠末期或成年,即使存活的克隆动物也存在一些健康和器官发育异常的问题。研究发现很多克隆动物的发育异常都与其胎盘发育缺陷相关[8]。克隆绵羊胎盘发育缺陷导致大量胚胎在妊娠阶段发育停滞或流失,胎盘表现出子叶数量减少和血管系统发育缺陷等问题[9]。因此,胎盘发育缺陷是导致克隆动物效率低下的重要原因之一。然而,目前克隆动物胎盘发育异常的分子机制尚不清楚。
MicroRNA(miRNA)是近几年在真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码RNA分子,其在转录和转录后水平上调控基因的表达[10]。miRNA参与细胞的增殖、分化和凋亡等过程,在胚胎和胎盘发育过程中发挥重要的调控作用[11]。miR-127和miR-136是两个位于印记基因retrotransposon-like(Rtl1)的GC岛附近的miRNA,而Rtl1是一个在胎盘发育过程中起到重要调控作用的关键基因[12]。Cui等[13]发现,在克隆小鼠囊胚中 miR-127的表达量及其启动子甲基化水平显著异常,证实miR-127在体细胞克隆小鼠胚胎中未被正确重编程。推测miR-127的不完全重编程可能导致克隆动物胎盘发育缺陷。……
