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芥菜型油菜A9染色体黄籽基因区域BAC重叠群的构建

2012-09-25袁玉辉胡学芳刘显军刘旭东刘忠松

湖南农业科学 2012年11期
关键词:支架

王 卓,袁玉辉,胡学芳,刘显军,刘旭东,刘忠松

(1.湖南农业大学生物科学技术学院,湖南 长沙 410128;2.湖南农业大学农学院,湖南 长沙 410128)

油菜是重要的油料作物,包括白菜型、芥菜型和甘蓝型三种类型,这三种类型的油菜具有共同的白菜来源的A 基因组[1]。A9 染色体是A 基因组中最长的染色体,长约37 Mb。A9 染色体上有控制种子大小[2]、种皮颜色[3]、硫苷合成[4-5]、油脂合成[6]等重要性状的基因。研究者对A9 染色体进行了大量研究,定位了大量SSR 标记,发现了许多基因[7-15]。Wang 等[16]公布了应用新一代测序方法测定的白菜基因组序列,为将这些标记、基因定位到A9 染色体对应BAC 和Scaffold 提供了基础。Mun 等[17]构建了由67468 个BAC 克隆组成的第一张白菜全基因组物理图谱,图谱上有242 个分布在10 个连锁群上的重叠群,长约717 Mb,对加速基因组序列分析、BAC 克隆序列的整合,以及芸薹属物种间的比较基因组研究起着重要的作用。

研究利用已构建的ZBjH BAC 文库,用A9 染色体上的标记进行PCR 步移筛选,构建重叠群,并与已测序的白菜A9 染色体物理图谱进行比较,分析芸薹属植物A9 染色体的进化和变异。构建芥菜型油菜A9 染色体黄籽基因区域物理图谱有助于黄籽候选基因的获得,为芥菜型油菜与白菜(白菜型油菜)、甘蓝型油菜A9 染色体进行比较物理作图提供基础,并为A9 染色体遗传图谱的加密和分子育种提供新的分子标记。

1 材料与方法

1.1 材 料

以芥菜型油菜作图群体亲本紫叶芥作为构建BAC 文库材料,提取植物幼叶总DNA,用Hind III不完全酶切,然后将酶切片段插入改良过的pIndigoBAC536 克隆载体构建芥菜型油菜BAC 文库即ZBjH 文库。……

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