王 迪, 曹 方, 栾 静, 孙 玉 梅

( 大连工业大学 生物工程学院, 辽宁 大连 116034 )

0 引 言

脂肪酶(EC 3.1.1.3)是一类能在油水界面上催化长链甘油酯水解和合成的羧酸酯酶[1],被广泛应用在油脂加工、食品、医药、日化等领域。微生物脂肪酶因其种类繁多,具有更广的作用pH、作用温度范围等优点得到了广泛的研究和应用[2]。发酵性丝孢酵母发酵产生的脂肪酶是胞内酶[3],细胞破碎是提取胞内脂肪酶的关键步骤,常用的破碎方法包括超声波法、高压匀浆法、研磨法和化学渗透法[4-7]。超声波细胞破碎是一种效果理想、条件温和的破碎方法,已广泛应用于微生物和植物细胞内蛋白质、糖类、核苷、油脂和酶类等物质的提取[8-12]。然而,超声波在细胞破碎过程中易引起特异性细胞壁的破坏、细胞液中高热量以及有害自由基的生成[13]。因此,研究最佳超声波提取条件对于最大限度的释放细胞内的活性物质,同时减少其损失具有重要意义。发酵性丝孢酵母胞内脂肪酶的系统研究在国内尚未见报道。本文研究了超声波的输出功率、每次辐射时间、工作总时间、菌体质量浓度对发酵性丝孢酵母细胞破碎的影响,以获得较高活性脂肪酶的适宜提取条件,为该脂肪酶的后续研究奠定基础。

1 试 验

1.1 菌 种

发酵性丝孢酵母(Trichosporonfermentans),CICC 1368,购自中国食品发酵工业研究院。

1.2 材料与仪器

78-1型磁力加热搅拌器,江苏金坛国华仪器厂；JYL-A010料理机,九阳股份有限公司；501型超级恒温器,上海市上海县试验仪器厂。

1.3 方 法

1.3.1 培养基及其制备