刘冬云 侯云生 王天轶 (白求恩国际和平医院急诊科，河北 石家庄 050082)

随着急诊溶栓、经皮冠状动脉成形术等再灌注治疗的开展，心肌再灌注损伤已成为阻碍缺血心肌从再灌注治疗中获得最佳疗效的主要难题。研究表明，Janus激酶-信号转导子与转录激活系统(JAK/STAT)信号通路与缺血预处理诱导的心肌保护及缺血再灌注损伤(I/R)引起的心功能障碍密切相关〔1〕。但目前有关JAK-STAT信号通路在心肌I/R中的作用还有争议。本课题拟研究抑制JAK/STAT信号通路对I/R大鼠心肌的影响，有助于从细胞信号转导水平研究I/R损伤的发病机制，从而为临床治疗I/R损伤提供新的方法。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 健康清洁级Wistar雄性大鼠24只，体重250～300 kg，河北医科大学实验动物中心购置，于清洁环境下自由饲养。将实验动物随机分为4组，假手术组(C组)，开胸后以5-0无损伤缝线直接穿过冠状动脉，不结扎;I/R组，建立I/R模型;JAK抑制剂——AG490(I/R+AG490)组，于 I/R前30 min腹腔注射AG 490(8 μg/g);STAT抑制剂——雷帕霉素(RMP)(I/R+RMP)组，I/R 前30 min腹腔注射 RMP(0.4 μg/g)。

1.1.2 主要试剂 兔抗JAK2多克隆抗体、兔抗STAT1多克隆抗体、兔抗STAT3多克隆抗体均为美国Santa Cruz公司产品，兔抗p-JAK2多克隆抗体、兔抗p-STAT1多克隆抗体、兔抗p-STAT3多克隆抗体均为美国Cell Signaling公司产品，TUNEL细胞凋亡试剂盒购于武汉博士德生物工程有限公司。

1.2 方法

1.2.1 大鼠心肌I/R模型的建立 Wistar大鼠以90 mg/kg选用3%戊巴比妥钠进行腹腔麻醉注射。固定大鼠，常规取材前准备，并记录全导心电图，以潮气量5 ml/100 g的小动物呼吸机辅助呼吸，造模过程中根据呼吸频率、强度调整其参数，于胸骨左侧约0.5 cm处、第3～5肋间切口……