郑凌云 赵宇红 (广东药学院基础学院生理学系，广东 广州 510006)

动物研究证实，高果糖饮食引起的血管内皮功能紊乱在促进高血压形成中有重要作用〔1〕，但其具体的分子基础并不清楚。研究表明，果糖代谢产生的甲基乙二醛等中间产物可促进血管平滑肌细胞产生活性氧(ROS)，并降低内皮细胞NO的释放，从而可能引起血管内皮功能紊乱〔2〕;而且果糖比葡萄糖更容易引起体内生物大分子的非酶糖基化作用〔3〕，从而产生糖基化终末产物(AGEs)。因此，高果糖引起的血管内皮功能紊乱可能是通过AGEs的形成而介导的。而目前有关AGEs的研究基本上都是利用葡萄糖制备所得，研究显示，AGEs可引起血管内皮细胞凋亡〔4〕。近年来的研究还提示，AGEs引起的血管舒张功能紊乱与血管紧张素受体(AT1)活化密切相关〔5〕。但对于果糖制备的AGEs对血管舒张的影响，以及AT1在其中的作用尚未见报道。因此，本研究采用离体大鼠胸主动脉环，研究高果糖制备的AGEs对血管环舒张功能的影响，以及AT1在其中的作用机制。

1 材料与方法

1.1 主要试剂及仪器 D-果糖(纯度≥99%，上海生物工程公司)，牛血清白蛋白(BSA，纯度≥98%，Sigma公司)，β-肌动蛋白(β-actin)抗体(boster bio-engineering公司)，p-eNOS(兔抗大鼠，Cell signaling technology)，磷酸化蛋白酶 B(p-AKT，兔抗大鼠，SAB)，powerlab生物信号采集处理系统(AD instrument，澳大利亚);雄性SD大鼠200～220 g(中山大学实验动物中心提供，合格证号:0098406)，组织裂解液(millipore公司)，N，N，N’，N’-四甲基乙二胺(TEMED，Sigma 公司)，聚偏氟乙烯(PVDF)膜(millipore公司)，抗兔二抗(boster bio-engineering公司)，蛋白酶抑制剂 cocktail(Sigma公司)，电化学发光法(ECL)化学发光剂(cell signaling technology公司)，酶联免疫分析仪(美国MJ research公司)，垂直电泳装……