束 波 范 芳 (遵义医学院生物化学与分子生物学教研室，贵州 遵义 563003)

再狭窄是经皮腔内冠脉介入术(PCI)术后的主要并发症，目前发生机制仍不明确。现有的研究表明再狭窄的发生主要与局部的炎症反应、内皮功能下降等有关，其中血管炎症反应也起了十分重要的作用〔1〕。骨髓间充质干细胞(BMSCs)具有多项分化潜能，经过血管内皮生长因子等因子的诱导，可以分化为内皮细胞;此外，与成熟内皮细胞共培养可以促进其向内皮方向分化，并部分抑制平滑肌细胞的增殖。BMSCs还具有独特的免疫学特性，参与多种免疫细胞功能的调节〔2〕。研究表明BMSCs这一作用与调节IL-10等相关炎性细胞因子的表达有关〔3〕。由此推测BMSCs移植对血管损伤后的炎症反应可能具有一定的调节作用。本研究拟观察移植BMSCs对损伤血管炎症因子表达及新生内膜增生的影响。

1 材料与方法

1.1 主要试剂及仪器 L-DMEM培养基、胎牛血清(Gibco公司，美国);DAPI(Sigma公司，美国);Percoll分离液(Pharmacia公司，美国);核转录因子-κBp65(NF-κBp65)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及增殖细胞核抗原(PCNA)一抗(武汉博士德公司);通用型免疫组化二抗试剂盒，ELISA检测试剂盒，FITC标记的二抗(北京中杉金桥生物技术有限公司)。2F球囊导管(Cordis公司，美国)。图像分析系统(Leica Qwin Plus公司，德国)。倒置荧光显微镜(Nikon，日本)。

1.2 实验动物与分组 雄性SD大鼠48只，2～3个月龄，体重质量200～300 g。大鼠右侧颈总动脉行球囊损伤后随机分为BMSCs组(n=24)和模型组(n=24)，BMSCs组接受BMSCs经尾静脉移植，对照组接受等量的PBS液注射。

1.3 BMSCs的培养、鉴定及标记 无菌条件下分离大鼠股骨，PBS液冲洗后获取新鲜骨髓液，通过密度梯度离心法分离出其中的单个核细胞，接种于含体积分数10%胎牛血清、青霉素、链霉素各100 U/ml的L-DMEM完全培养液中，置于37℃，体积分数5%CO2孵育箱中培养。……