潘发福 梁明春 刘卉芳 吕 诚 胡小令 万 斌 杨宝林 聂 菁

(南昌大学医学院解剖学教研室，江西 南昌 330006)

慢性脑缺血(CCI)所致的免疫炎症反应可引起神经元变性死亡，损害突触可塑性，从而构成了CCI导致认知功能损害的重要病理生理基础〔1〕。突触素(SYN)是突触前囊泡上的一种蛋白质，参与神经递质的释放，是突触终末的特异性标记物〔2〕。突触后致密物95(PSD-95)是突触后致密物中含量最丰富的骨架蛋白，在突触后膜受体定位和信号传导通路中发挥重要的作用。雷公藤提取物雷公藤多甙可以改善CCI大鼠认知功能〔3〕。本实验通过双侧颈总动脉永久性结扎法(2-VO)建立CCI动物模型，选取突触相关的两种蛋白(SYN、PSD-95)作为检测指标，进一步探讨雷公藤多甙的主要成分雷公藤内酯醇对CCI模型大鼠突触可塑性的保护作用。

1 材料与方法

1.1 主要试剂及仪器 雷公藤内酯醇(纯度为99.8%，批号070929，福建省医学科学研究所，溶于4%丙二醇溶液中);SP试剂盒(Zymed公司);DAB显色试剂盒(北京中杉公司);SYN、PSD-95兔抗(北京博奥森生物技术有限公司);PCR扩增用引物(上海生物工程有限公司);2×EasyTaq PCR SuperMix(北京全式金生物技术有限公司);RevertAidTM HMinus First Strand cDNA Synthesis Kit(Formentas公司);快速恒温冰冻切片机YD-1508Ⅲ(浙江金华益迪医疗设备厂);Image.Pro Plus v5.1显微图像分析系统(Media Cybernetics公司);MG25+基因扩增仪(杭州朗基科学仪器有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 动物分组和模型建立 取30只4月龄、体重250～275 g的健康雄性SD大鼠(南昌大学实验动物科学部提供)，随机分成:对照组、模型组、治疗组。模型组和治疗组大鼠采用2-VO建立CCI模型:腹腔注射1%戊巴比妥钠(40 mg/kg)，常规碘附消毒，取颈部正中切口，分离出颈总动脉，永久性结扎双侧颈总动脉，确认结扎稳妥后用无菌生理盐水清洗伤口，检查伤口，无明显出血后用1号丝线逐层缝合切口。……