王 静，陈冬妮，欧芷华，袁 文，邓庆丽，陆勇军，张 钰

(1.广东省实验动物监测所(广东省重点实验室)，广州 510262;2.中山大学生命科学学院，广州 510275)

实时荧光定量PCR技术在SPF鸡四种垂直传播疾病监测中的应用

王 静1，陈冬妮2，欧芷华2，袁 文1，邓庆丽2，陆勇军2，张 钰1

(1.广东省实验动物监测所(广东省重点实验室)，广州 510262;2.中山大学生命科学学院，广州 510275)

目的 探讨荧光定量PCR检测技术对SPF鸡四种垂直传播病毒的检测应用。方法 采集60份SPF鸡及70份普通鸡群蛋清、泄殖腔试子样品，提取样品核酸，分别进行 ARV、REV、CAV、ALV四种病毒实时荧光定量PCR检测，根据标准曲线及溶解曲线分析判读样品病毒拷贝数。结果 SPF鸡 ALV 2份阳性，检出率3.3%，其余病毒检测均为阴性;普通鸡样品REV检测2份阳性，检出率2.9%，ALV 10份阳性，检出率14.3%。结论 荧光定量PCR检测方法最低可检测到100个拷贝核酸，检测灵敏度较高，有望应用于SPF鸡临床样品的病原检测。

实时荧光定量PCR;禽网状内皮增生症病毒;鸡传染性贫血病毒;禽白血病病毒;禽呼肠孤病毒;SPF鸡

SPF鸡及SPF鸡胚是农业、生物医学及生物制品研究、生产、检验中不可缺少的标准实验动物和实验材料，其质量是否达标，直接影响科研结果和实验数据的可靠性以及生物制品产品质量。2010年版《中国兽药典》附录《生产、检验用动物标准》明确要求，用于禽类制品毒种制备与鉴定、病毒活疫苗生产与检验、灭活疫苗检验的鸡和鸡胚应符合国家无特定病原体(SPF级)动物标准［1］。近年来，我国兽用生物制品行业发展迅猛，企业在进行疫苗外源病毒质量控制的过程中对SPF鸡(蛋)的量和质会提出愈来愈高的要求，迫切需要加快我国SPF鸡的微生物学监测方法、试剂的研究。……