刘 畅，杨基先，李 昂，李 旭，马 放，陆 建

(1.哈尔滨工业大学城市水资源与水环境国家重点实验室，150090哈尔滨;2.中国宜兴环保科技工业园科技发展局，214200江苏宜兴)

生物破乳剂的高效性和环保性是化学破乳剂无法比拟的.在原油脱水、油污分离、含油废水处理等领域开发、应用前景十分广阔［1-6］.目前，生物破乳剂仍处于实验室研发阶段，无法进行大规模应用，其中野生型生物破乳剂产生菌的破乳能力和破乳活性物质产量较低成为主要限制因素之一.因此，采用人工诱变或生物改造方法对野生型的生物破乳剂产生菌进行改造，提高生物破乳剂的产率及活性，对生物破乳剂的工程化应用具有重要意义.

以人工诱变基因突变为基础的诱变育种方法，如利用物理(紫外辐射、微波)和化学(亚硝基胍、亚硝酸等)诱变获得突变体，已成为发酵工业中获得优良高产菌株的主要途径，也是研究微生物生理代谢机制的主流方法［7-8］.传统的诱变育种多采用单一的诱变方法，盲目性和随机性较大，且随着诱变次数的增多，菌种的耐受性增强，诱变效率下降.因此，使用多种诱变方法，通过协同作用进行复合诱变成为诱变育种的一个重要趋势.为提高生物破乳菌的破乳能力，对生物破乳剂产生菌Bacillus mojavensis XH1进行复合诱变育种研究，筛选高效的破乳剂产生菌突变株，为工业生产提供优质的菌种资源.

1 实验

1.1 实验材料

1.1.1 出发菌株

生物破乳剂产生菌株XH1分离自大庆油田受石油……