辣椒根腐病拮抗细菌D221发酵条件的研究
2012-08-08刘培福何付丽曲春鹤纪明山赵长山
刘培福,何付丽,,曲春鹤,纪明山,赵长山
(1.东北农业大学农学院,哈尔滨 150030;2.沈阳农业大学植物保护学院,沈阳 110161)
由腐皮镰孢菌(Fusarium solani)侵染引起的辣椒根腐病,是一种典型的土传病害。该病主要危害根部,病部皮层下呈淡或深褐色[1-2],一般年份发病率10%,重时达20%~30%,重病地块甚至达50%[3]。目前,国内外系统研究辣椒根腐病的较少,现有的土壤消毒剂中,防效有限,熏蒸剂高毒且价昂,操作麻烦;采取换地移棚的防治方法,不仅使投资增加且局限性强,限制了棚菜生产的发展[4-5]。利用拮抗细菌及其发酵产物防治辣椒根腐病是一种具应用前景的探索[6]。为了实现拮抗细菌的工业化生产,必须优化细菌的发酵条件,目前关于拮抗细菌的发酵培养主要包括液态发酵和固态发酵[7-8]。D221菌株是从辣椒根际土壤中分离得到的,经过离体和活体实验测定,该菌株对辣椒根腐病病原菌有良好的拮抗活性。本试验研究了D221菌株的摇瓶发酵培养基成分、发酵条件对该菌生长和产生抗菌物质能力的影响,为其发酵生产提供依据,并为进一步利用该菌株产生的抗菌物质开发创新农药奠定基础。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 菌种
拮抗细菌D221,从生长健康的辣椒植株根际土壤中分离、筛选获得。病原指示菌,辣椒根腐病菌(Fusarium solani),由东北农业大学植物病理实验室提供。
1.1.2 供试培养基
种子培养基,牛肉膏3.0 g、蛋白胨5.0 g、葡萄糖5.0 g、NaCl 5.0 g、蒸馏水1 000 mL;原始发酵培养基,牛肉膏3.0 g、蛋白胨5.0 g、葡萄糖10.0 g、NaCl 5.0 g、蒸馏水1 000 mL。
1.2 方法
1.2.1 培养基组分的筛选
分别用10 g·L-1葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、可溶性淀粉、糊精、甘油、玉米淀粉代替原始培养基中的碳源,以不加碳源的处理为对照;……
