牛妊娠早期精准ELISA检测
2012-07-30KathyVelekShonaMichaudKateBoucherAnnaRiceLoriPlourdeNevenaDjuranovicChristophEgliPeterWellesValerieLeathers
Kathy Velek Shona Michaud Kate Boucher Anna Rice Lori Plourde Nevena Djuranovic Christoph Egli Peter Welles Valerie Leathers
1.IDEXX Laboratories Inc.,Westbrook-Maine 04092;2.IDEXX Switzerland AG,Liebefeld-Bern 3097
精准及时的牛妊娠检测,是当今牧场繁殖管理方案的一项重要组成部分。兽医和牧场主通过检测尽早发现空怀牛,能够及时配种并缩短胎间距,从而帮助牧场实现产奶量和利润的最大化(图1)。
另外,通过频繁妊娠检测也能够优化胎间距,空怀天数每增加1d,养殖成本可增加32.9元/d或5美元/d。爱德士公司研发了ELISA妊娠检测方法,最早能够在配种后28d精准检测,为兽医和牧场主提供了另外一种空怀牛早期鉴定的工具。
1 材料与方法
爱德士牛妊娠检测试剂盒,以牛血清或血浆中存在的早期妊娠相关糖蛋白(PAGs)作为判断妊娠的标志。试剂盒中抗-PAG抗体包被在固相板上,结合样品中可能含有的PAGs。生物素偶联PAG二抗与链霉亲和素辣根过氧化物酶(SA-HRP)一起作为检测试剂。TMB底物作为含有PAG样本的显色剂,并用终止液停止酶促反应。在450nm波长下读数,显色超过试验阈值的孔被认定为阳性,表明牛妊娠;若没有显色或显色不明显,表明牛空怀(图2)。
从奶牛场或肉牛场采集血清或血浆,来评估爱德士公司妊娠检测试剂的敏感性和特异性。实验中总共使用783份血清样本和1001份血浆样本,这些样本来自美国各地,包括缅因州、佛蒙特州、纽约州、威斯康星州、宾尼法吉亚州、华盛顿州、印第安纳州以及瑞士和中国。根据产品说明书操作,用爱德士ELISA检测样品。牛的妊娠状况通过超声波和直肠检查来确认。
2 结果与分析
检测采自整个妊娠期的样品,结果表明妊娠期PAG水平始终保持在阈值之上(图3)。……
