闫海燕

(宝鸡文理学院 陕西省植物化学重点实验室，陕西 宝鸡 721013)

大黄(RheumpalmatumL.)为蓼科植物掌叶大黄、唐古特大黄和药用大黄的干燥根及根茎，是一种多年生草本植物，其主要药用成分为蒽醌类衍生物[1]。作者建立了同时测定大黄提取物中芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的高效液相色谱法，拟为该药材的质量控制提供依据。

1 实验

1.1 材料、试剂与仪器

马蹄大黄，宝鸡方晟药业公司。

芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚对照品，纯度>98%，天津马克生物技术有限公司；甲醇为色谱纯；实验用水为娃哈哈纯净水。

Agilent 1200型高效液相色谱仪，美国；CP225D型电子分析天平，德国Sartorius；KQ-300VDE型双频数控超声波清洗器。

1.2 色谱条件

色谱柱：Prontosil-C18-ace-Eps(250 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为甲醇-水(90∶10，体积比)，流速1.0 mL·min-1，检测波长254 nm，柱温25 ℃，进样量20 μL。

1.3 对照品溶液的配制

精密称取适量芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚对照品，加甲醇定容至刻度，分别配制成32.6 μg·mL-1、65.0 μg·mL-1、49.6 μg·mL-1的对照品溶液，备用。

1.4 供试品溶液的制备

称取0.5 g生药大黄粉末，精密称定，加入甲醇25 mL，加热回流30 min，放冷，滤过，取滤液5 mL蒸干，残渣加8%盐酸溶液10 mL，超声提取2 min，再加氯仿10 mL，加热回流1.5 h，放冷，置分液漏斗中，用少量氯仿洗涤容器也置于分液漏斗中，分取氯仿层，酸液再用氯仿提取3次，每次10 mL，合并氯仿液，减压回收氯仿，残渣用甲醇溶解并转移到10 mL容量瓶中定容。摇匀，滤过，取滤液作为供试品溶液。

1.5 线性关系考察

精密移取芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚混合对照品溶液，按1.2色谱条件进样测定。以峰面积(y)为纵坐标、对照品浓度(x)为横坐标绘制标准曲线，并进行线性回归。