江 薇，李雪竹，严海东

(同济大学附属东方医院肾内科，上海 20120)

环孢菌素A(Cyclosporin A，CsA)是一种由亲脂性不完全真菌Tolypocladium inflatum Gams在生长过程中产生的多肽混合物，是自然界25种环孢素中免疫抑制活性最强的一种。CsA应用于器官移植后的抗排斥反应，使器官移植的预后得到了极大改观［1-2］。近年来，CsA还用于难治性肾病综合征的治疗，取得了良好的效果。但CsA的一些严重不良反应尤其是肾间质纤维化的慢性肾毒性限制了该药的应用［1］。研究发现，CsA诱导氧化应激产生过多的活性氧(Reactive oxygen species，ROS)是CsA慢性肾毒性发病机制之一［1］。银杏叶标准提取物(Ginkgo biloba extract，EGb)具有抗氧化作用，我们以前的研究发现其具有减轻氧化应激反应，减轻纤维化，具有肾脏保护作用［3］，但EGb对于CsA慢性肾损伤的作用机制尚不清楚。本实验建立CsA慢性肾损伤动物模型，观察肾小管间质细胞凋亡、细胞周期蛋白p27的表达及EGb对其的影响，以期为寻找有效的防治CsA肾毒性的药物提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 主要材料及仪器

雄性Wistar大鼠20只，体质量200～230 g，购自并饲养于复旦大学医学院实验动物中心(SPF级)。CsA购自瑞士诺华公司，EGb(含黄酮甙24.1%，银杏苦内酯9.1%)由上海信谊百路达药业有限公司提供。细胞凋亡检测试剂盒I(POD)购自武汉博士德生物公司，兔抗大鼠p27多克隆抗体购自美国Santa Cruz公司，辣根过氧化物酶标记的羊抗兔第二抗体、3，3-二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒均购自洛阳华美公司。UV-2102 PCS型紫外可见分光光度仪(德国Unicon)，低温高速离心机(美国Beckman)，光学显微镜(日本Olympus)。

1.2 CsA慢性肾毒性模型的建立及分组

选用雄性 Wistar大鼠20只，体质量 200～230 g，饲养环境温度维持在(20±2)℃，相对湿度(40% ～60%)，光照12 h，自由进食、饮水，大鼠适应性正常饲养1周。……