梅 峻，谷 丽，陆凤凤，杨 蓉

(同济大学附属第十人民医院儿科，上海 200072)

目前，认为小儿慢性心力衰竭(chronic heart failure，CHF)发生是由心室重塑引起。基质金属蛋白酶(MMPs)是降解细胞外基质成分的主要蛋白水解系统，金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)是(MMPs)的内源性特异性抑制剂，本文拟通过建立后负荷过高的慢性心力衰竭幼鼠实验模型，用免疫组化法检测心力衰竭幼鼠心肌MMP-9、TIMP-1的表达，以探讨 MMP-9、TIMP-1在心室重塑中的作用。

1 材料与方法

1.1 动物模型制作及实验分组

60只雄性5～6周龄Wistar幼鼠，对照组10只(仅开腹并分离腹主动脉，但不予以结扎)，余50只采用肾上腹主动脉缩窄法制作慢性心力衰竭模型，喂养5周后，死亡22只，余28只幼鼠中有18只出现明显心力衰竭表现，随机抽取这18只幼鼠中的10只行血流动力学测定，证明均达到心力衰竭(左室舒张末压≥15 mmHg)［2］，作为心力衰竭组，检测血流动力学参数，用Masson染色法观察左室心肌胶原形态，图像分析测量胶原容积分数(CVF)和血管周围胶原面积(PVCA)，免疫组化法检测心室肌中MMP-9、TIMP-1表达。

1.2 血流动力学检测

观察期满后测血流动力学指标。10%乌拉坦腹腔麻醉，导管内充满肝素，右颈总动脉逆行插管至左心室，另一端接多媒体生物信号记录仪系统，记录分析后得左室舒张末压(LVEDP)。

1.3 检测指标

1.3.1 血流动力学指标 9周后测左室舒张末压(LVEDP)。

1.3.2 幼鼠心肌细胞和胶原的定性和定量分析取左室纵截面心肌组织，常规固定、包埋和制片，进行MASSON染色:在MASSON染色下心肌细胞呈红色，胶原呈蓝色。采用 Biosens Digital Imaging System医学图像分析系统，测量心肌胶原容积分数(CVF)及心肌血管周围胶原面积和管腔面积之比(PVCA)。……