COPD患者TH17细胞的表达及糖皮质激素的调节作用
2012-07-20温雪萍颜志军高习文
彭 清,温雪萍,颜志军,高习文
(上海市闵行区中心医院呼吸内科,上海 201199)
慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是呼吸系统常见的疾病,在吸烟等环境因素的作用下,其发病率在全球范围内不断增加。和支气管哮喘一样,COPD也是一个气道炎症性疾病,中性粒细胞的募集和活化是COPD发病中的一个关键环节。TH17细胞是新发现的除TH1细胞和TH2细胞之外的 CD4+T细胞[1-2],其分泌的IL-17具有强大的招募中性粒细胞的功能[3-6]。THl7细胞在COPD的发病中扮演重要角色[7]。因此,进一步探讨TH17细胞在COPD中的具体作用及其机制显得尤为迫切。近年来,糖皮质激素在COPD尤其是重度、极重度COPD中的应用越来越受到重视。糖皮质激素能降低IL-17、IL-6和TNF-α等细胞因子的表达[8-9],那么糖皮质激素是否也通过对TH17的调节达到抑制COPD慢性炎症过程,目前尚无报道。本课题通过比较健康人群、COPD稳定期患者TH17细胞构成和细胞因子分泌情况,探讨TH17细胞在COPD中的作用;通过应用糖皮质激素对COPD患者进行干预,探讨糖皮质激素是否通过对TH17的调节达到抑制COPD慢性炎症过程。本研究有助于明确COPD的发病机制,对于今后COPD患者的治疗提供了新的思路。
1 材料与方法
1.1 试剂
PE-CY5抗人CD4单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)购自BD pharmingen公司。PE抗人IL-17mAb及同型对照均购自ebioscience公司。佛波酯(Phorbol 12-myristate-13-acetate,PMA)、离子霉素(Ionomycin)、莫能菌素(Monensin)、植物血凝素P(Phytohenmagglutinin-P,PHA)及皂素购自美国Sigma公司。人淋巴细胞分离液购自上海博蕴生物科技有限公司。RPMI1640培养液、胎牛血清购自Gibco公司。人细胞因子IL-17、IL-4及IFN-γ的酶联免疫吸附实验(ELISA)试剂盒购自R&D公司。
1.2 研究对象
根据慢性阻塞性肺疾病诊治指南……