LDL对小鼠成骨细胞的影响

2012-07-20倪菊花翟玉娟

同济大学学报(医学版) 2012年6期

倪菊花，翟玉娟，周筠，雷涛

(同济大学附属同济医院内分泌科，上海 200065)

骨质疏松症(Osteoporosis，OP)是一种以单位体积内骨量降低，骨组织微结构退化，骨皮质变薄，骨小梁数目减少，骨髓腔增宽，骨强度减低为特征，导致骨质脆性增加易于发生骨折的全身性疾病。随着我国人口的老龄化，骨质疏松症正在成为一种新型的流行病，由骨质疏松症引起的骨折及其他并发症严重影响患者生活质量，给国家和社会造成了极大的经济负担。因此，如何有效预防和治疗骨质疏松症成为了近年来研究的一大热点。众多研究表明，血脂紊乱和骨质疏松之间关系密切［1-4］，但结论不一，仍存在着很大的争议，且其之间相互关联的确切机制也尚不明确。本课题拟检测低密度脂蛋白(Low density lipoprotein，LDL)对于MC3T3-E1成骨细胞增殖、分化能力的影响，并利用实时荧光定量技术检测LDL作用下的LRP5、DKK1基因mRNA表达情况，以分析其可能的作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验细胞

成骨细胞株MC3T3-E1购于中国科学院细胞库，于同济医院保种。

1.2 主要实验材料、试剂和仪器

LDL购于广州奕源生物科技有限公司，小鼠骨钙素ELISA Kit购于美国IBL公司，细胞培养瓶、培养板购自美国Corning公司，高糖a-MEM培养基及胎牛血清均购自美国 Gibco公司，TRIzol购于Invitrogen公司，PrimeScriptTM RT reagentKit(Perfect Real Time)DRR037A购于Takara公司，SYBR Premix Ex Taq(Perfect Real Time)DRR041A购于Takara公司，引物由上海生工生物有限公司合成。酶标仪(METERTECH Σ960)，培养箱(Thermo HEPA class100)，荧光定量 PCR仪(Roche Cycler application system Version 1.5)。