天水师范学院生命科学与化学学院 马旭光 张宗舟 柳 芸 赵国婵

甘肃省航天育种工程技术研究中心 霍建泰

目前，在产生β-葡萄糖苷酶的众多微生物中，黑曲霉因其所产β-葡萄糖苷酶提取容易、酶活力高、安全性好等优点而明显优于其他菌种。但长期以来，由于在实际生产中缺乏优良的产酶菌株，β-葡萄糖苷酶活性低、产量低、稳定性差等问题至今尚未解决。黑曲霉ZM-8是一株经航天诱变选育出的高产β-葡萄糖苷酶的突变株，该菌株能发酵小麦秸秆粉和玉米秸秆粉等纤维质并产生具有较高活力的β-葡萄糖苷酶 （刘星斌等，2009）。通过前期试验，已优化了影响玉米秸秆粉为主要原料进行固态发酵生产β-葡萄糖苷酶的主要因素，包括麸皮添加量、氮源及其含量、含水量和接种量等（马旭光等，2011）。本试验在此基础上，对影响该菌株产β-葡萄糖苷酶的发酵时间、发酵温度和初始pH等主要环境因素进行了优化，并对该菌株所产β-葡萄糖苷酶的酶学特性进行了初步研究，以期为利用该菌株工业化生产β-葡萄糖苷酶及在饲料中的规模化应用提供试验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 发酵菌种 黑曲霉ZM-8（Aspergillus nigerZM-8），经航天诱变后由天水师范学院生命科学与化学学院微生物工程实验室和中国科学院天水航天育种基地联合选育获得（马旭光等，2007）。目前保存于中国典型培养物保藏中心（CCTCC NO：M209125）。

1.1.2 主要试剂及仪器 水杨酸苷购于Sigma公司，3，5-二硝基水杨酸等其他试剂均为国产分析纯；TGL-20M高速冷冻离心机（湘仪仪器厂），722型分光光度计（上海欣茂仪器有限公司）。……