肺腺癌相关蛋白的筛选及鉴定
2012-07-05孙明飞宋言峥张双林董彦军杨忠信
河南大学学报(医学版) 2012年4期
孙明飞,宋言峥,张双林*,董彦军,杨忠信
(1.河南大学第一附属医院 胸心血管外科,河南 开封 475000;2.复旦大学 附属公共卫生临床中心,上海 200540)
肺癌是全世界最常见的恶性肿瘤之一,其发病率 占所有新发恶性肿瘤患者的12.6%,死亡率占恶性肿瘤的17.8%,且逐年呈上升趋势[1]。近些年来,肺腺癌的发病率明显增长,约占发病率较高的肺鳞状细胞癌的30%~40%[2]。因此,研究肺腺癌的发病机制、早期诊断及治疗方法已成为肿瘤学研究的迫切任务。目前临床中主要的诊断方法有影像学、实验室生化检查、病理学等手段,但仍然有很大一部肺腺癌不能早期明确。随着蛋白质组学技术的出现及发展,蛋白质组学已被广泛应用于各种疾病及同一疾病不同层面的研究。它能直接从蛋白质水平入手,寻找与疾病相关的特异性蛋白质,为多种疾病的发病机制研究及早期临床诊断提供依据。我们利用成熟的双向电泳技术结合基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术,建立稳定的比较蛋白组学技术平台,从而获得肺腺癌双向凝胶电泳图谱并初步筛选及鉴定肺腺癌相关蛋白,为寻找肺腺癌发生、发展中特异性的肿瘤标志物奠定基础。
1 材料与方法
1.1 材料
手术切除的新鲜肺腺癌组织及同一患者配对癌旁组织标本18例,取自河南大学第一附属医院,标本均经病理学诊断为肺腺癌。IPG预制胶条(pH3~10,18cm),尿素,硫脲,三丁基膦,二硫苏糖醇,苯甲磺酰氟(BioRad公司),三氟乙酸、乙腈、碘乙酰铵(Sigma公司),clean-up试剂盒、银……
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