刘红芳，肖龙泉，袁显棚

（长江师范学院，重庆涪陵，408100）

茎瘤芥 （Brassica junceavar.tumidaTsen et Lee）是重庆市三峡库区农业支柱产业之一，是茎瘤芥主产区涪陵农民收入的主要来源。此外，在重庆市的渝北、万州、长寿、忠县和丰都等地区，也有较大面积种植。随着茎瘤芥种植面积的增加，黑斑病的发生日趋严重，极大地影响了茎瘤芥的生产。引起十字花科蔬菜黑斑病的主要是半知菌亚门丝孢纲丝孢目链格孢属真菌，包括芸薹链格孢（Alternaria brassicae）、甘蓝链格孢（A.brassicicola）和萝卜链格孢（A.japonica）3个种[1]。链格孢属内不同种之间培养性状不稳定，且高度相似和重叠，在实际操作中用传统方法很难鉴定到种的水平[2]。近年来，有学者在对十字花科蔬菜黑斑病菌3个种及相近种的5.8S rDNA和其侧翼ITS区进行测序的基础上，分别设计合成了鉴定白菜黑斑病菌3个种的特异性引物[3]。为了明确茎瘤芥黑斑病的病原，为该病害防治提供理论依据，对该病害的病原物进行了分离鉴定，现将研究结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 病害标本采集及病害病状观察

茎瘤芥黑斑病标本于2011年12月分别在涪陵李渡、义和、焦石、马武、农科所等茎瘤芥种植区采集，并对田间病害植株进行病害症状观察记录。

1.2 病原菌的分离和培养

采用马铃薯、葡萄糖、琼脂培养基（PDA）进行常规组织分离培养。分离到的菌株经单孢纯化后保存于PDA斜面上，置于4℃冰箱中贮存备用。

1.3 致病性测定

采用活体接种法。在无菌环境下挑取孢子并将其接入无菌水中，制备接种液，对健康的叶片采用正背面喷雾接种，重复喷雾3次，同时对对照组喷无菌水，最后在植株叶片上套上塑料袋，室内25℃保湿培养并进行观察[4]。……