吴 霞，吴长艾，上官小霞，马燕斌，翟晓菊，李燕娥

（1.山西省农业科学院棉花研究所，山西运城 044000；2.山东农业大学生命科学学院，山东泰安 271018）

我国盐碱土壤的分布区域广阔，总面积为0.33多亿hm2，其中占耕地总面积10%以上的0.13多亿hm2具有农业利用潜力。随着生态环境的恶化，土壤呈现沙漠化、盐碱化的趋势逐年加重，全球盐碱地每年增加100万～150万hm2。为此，利用生物技术改造植物，应用分子育种改良作物耐盐抗逆性状，培育作物耐盐抗逆新品种尤为重要。目前，国内不同单位相继开展了玉米、水稻、小麦等作物的耐盐性研究[1-4]。另外，棉花是盐碱地种植的主要作物之一，转基因耐盐碱棉花的培育是“十一五”转基因重大专项研究内容重点之一。

本研究通过生物技术导入棉花耐盐性基因GhNHX1，旨在使其过量表达来提高棉花植株的耐盐能力。

1 材料和方法

1.1 材料

转基因受体与对照均为陆地棉棉花品系R15，4092为利用农杆菌介导法[5-6]转化外源陆地棉耐盐基因GhNHX1获得的纯合棉花株系，其中，GhNHX1基因编码543个氨基酸。

1.2 抗性检测方法

1.2.1 转基因GhNHX1棉花种子不同盐含量发芽试验 NaCl设置5个不同含量梯度：0，0.5%，1.0%，1.5%，2.0%，每个处理分别为40粒种子。种子用15%H2O2灭菌2～3 h，无菌水洗2～3次。在不同盐含量浸种24，48 h后，观察种子的萌发状况。

1.2.2 转基因GhNHX1棉花种子不同盐含量培养基耐盐性检测 所有试验棉花种子经15%H2O2灭菌2～3 h后，用无菌水洗2～3次。盐含量为0的无菌水浸种24 h后，取发芽好的种子种入盐含量为2.0%的1/2 MS种苗培养基中，5 d（120 h）后称量统计棉花苗生物鲜质量。

1.2.3 转基因GhNHX1棉花种子在不同盐含量盆栽耐盐性检测 土壤晾干后加入5个不同NaCl含量的培养基中，盐含量梯度同1.2.1。……