黄玉，戈伟，张令，丁万军，李长虎，唐甜

(武汉大学人民医院肿瘤科，湖北武汉 430060)

放疗是临床上广泛应用于肺癌治疗的重要手段，而单纯放疗效果并不令人满意，如何提高放疗对肿瘤的局部控制率是近年来研究者们探讨的热点问题。自上世纪70年代Folkman提出以肿瘤血管和血供为靶点的治疗策略以来，抗血管生成药物及相关治疗得到深入研究。一些研究［1-3］表明，抗血管生成药物联合放疗可以不同程度地解除放疗的局限性，从而达到“1+1＞2”的效果。本研究将已经在国内上市的抗血管生成药物重组人血管内皮抑素(Endostar)与放疗联合，观察对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长和对碳酸酐酶Ⅸ(CAⅨmRNA)、钙粘连蛋白(E-cad mRNA)表达的影响，进一步探讨Endostar对放疗的协同增敏机制。

1 材料与方法

1.1 材料

32只C57 BL/6小鼠，雌性，SPF级，6～8周，体重18～22 g，购于湖南斯莱克景达实验动物有限公司;荷Lewis肺癌C57 BL/6雌性小鼠，4只(购于四川省医学科学院实验动物研究所)，于左前肢腋下可触及直径1.5 cm左右的肿块;小鼠饲养于武汉大学人民医院SPF级实验动物饲养室(No.00016218)。

1.2 主要试剂和仪器

Endostar(15 mg/3 ml/支，先声药业公司产品，生产批号20100305);山东新华Fcc-8000F型Co治疗机;美国SHELDM2300型二氧化碳培养箱;北京海博川科技有限公司超净工作台。

Trizol Reagent(货号15596-026)、逆转录试剂盒(货号C28025-011)均购于美国Invitrogen公司;SYBR Green mix(货号QPK212 plus)购自于日本TOYOBO公司;台式高速冷冻离心机和BeckmanTJ-6型水平式离心机为德国Sigma公司生产;Real time PCR采用上海宏石医疗科技有限公司生产的定量PCR检测系统。

1.3 构建动物模型

取对数生长期Lewis肺癌细胞，调整细胞浓度为1×106个·ml-1单细胞悬……