绯寒樱细胞悬浮培养技术研究
2012-06-21王莉
绿色科技 2012年7期
关键词:生长
王莉
(南昌大学 科学技术学院,江西 南昌 330029)
1 引言
绯寒樱(PrunuscampanulataMaxim.)为蔷薇科李属落叶小乔木,又名福建山樱花,其树形优美,早春着花,花色呈粉红至绯红色,颜色鲜艳,满树繁花高雅脱俗,令人心旷神怡,是优良的行道树和风景林树种。近年在福建、湖北、广东等地示范栽培,深受消费者的欢迎。但由于收集种子困难和扦插繁殖技术不成熟[1],各种规格的苗木生产供不应求。目前,绯寒樱离体快繁技术已有少量报道[2,3],但主要集中在丛生芽诱导和生根诱导的研究,国内尚无绯寒樱细胞悬浮培养研究的报导。本文采用绯寒樱嫩枝为外植体材料,诱导出绯寒樱愈伤组织,进一步建立起绯寒樱细胞悬浮培养体系,为加快绯寒樱组培技术奠定基础。
2 材料与方法
2.1 材料
供试材料为绯寒樱野生树的嫩枝[4]。
2.2 方法
2.2.1 无菌外植体的获得接种材料为当年抽生侧芽饱满的幼嫩茎段,在自来水下冲洗0.5h,然后在超净工作台上用1g/L的HgCl2溶液消毒6min,无菌水冲洗5次,70%的酒精浸泡30s,无菌水冲洗2遍,用灭菌滤纸将残留于外植体表面的水分吸干。接着将外植体放入经灭菌处理的瓶中,1%L汞水浸泡7min(为确保外植体得到全面彻底的灭菌,要将瓶子加以摇荡),然后用无菌水冲洗5遍以上,备用。
2.2.2 愈伤组织的诱导
在无菌条件下,借助显微镜将外植体顶端剥开,切取长约0.8cm、带生长点及叶原基的茎段,接种于1/2MS+0.5 6-BA+0.01NAAmg/L培养基上15d诱导出愈伤组织。于 MS+1.0 6-BA+0.5NAAmg/L培养基上继代培养,取继续培养25d的愈伤组织。
2.2.3 樱花细胞悬浮培养体系……
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