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扁桃体和外周血CD8+T细胞表达CXCR5和IL-21水平对比分析

2012-06-05方会珍曹莉萍

实验与检验医学 2012年2期
关键词:差异检测

方会珍,曹莉萍

(1、江西省中医药研究院检验科,江西 南昌 330046;2、南昌大学第二附属医院检验科,江西 南昌 330006)

扁桃体是人体的次级淋巴组织。近年来,在次级淋巴组织的生发中心(Germinal center,GC)发现了一个特殊的CXCR5+CD4+T细胞亚群,被命名为滤泡辅助性T细胞(follicular T helper cells,Tfh),目前认为是B细胞产生抗体和发生类别转换,执行有效的体液免疫应答的主要辅助性T细胞亚群[1-2]。然而,在GC反应中,T细胞与B细胞的相互作用机制及过程迄今为止并未完全清晰,尤其是CD8+T细胞在其中是否发挥作用,目前文献也鲜见报道。本文利用流式细胞检测技术,分析比较了扁桃体和正常人外周血中CD8+T细胞表达CXCR5和IL-21的水平,为进一步探讨外周淋巴组织中CD8+T细胞的异质性提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验对象 15例扁桃体组织来自因反复炎症发作而行扁桃体切除(不分侧别)的患者,其中男性10例,女性5例,年龄5~28岁,平均17.3岁。每位患者术前两周内均无急性发炎史,且未行任何抗菌素治疗,术前血尿常规检查均正常。12例外周血标本来自健康体检者,男性8例,女性7例,年龄10~42岁,平均22.8岁。

1.2 主要试剂和仪器 RPMI-1640 不完全培养液、牛血清白蛋白(BSA)、佛波酯(PMA)、离子霉素(Ionomycin)购自美国Sigma 公司,胎牛血清购自杭州四季青公司,淋巴细胞分离液购自中国医学科学院血液学研究所,FITC 标记的鼠抗人CD8 单克隆抗体(FITC-CD8 mAb)、APC-CXCR5 mAb、PE-CD69 mAb 及其同型对照购自美国BD Pharmingen 公司,PE-IL-21mAb 及其同型对照购自美国eBioscience公司,流式细胞仪Calibur 购自美国BD 公司。

1.3 人扁桃体单个核细胞的制备 将手术摘除的新鲜扁桃体组织,用生理盐……

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