王庭辉，马晖玲

（甘肃农业大学 草业学院/草业生态系统教育部重点实验室/甘肃省草业工程实验室/中－美草地畜牧业可持续发展研究中心，甘肃 兰州 730070）

紫花苜蓿（Medicago sativa）属豆科多年生植物，是世界上最重要的饲料作物，有“牧草之王”的美称，目前世界苜蓿栽培面积为3500万hm2，在我国已有2000年的栽培历史［1］。自1958年Renert和Steward从胡萝卜愈伤织和悬浮细胞体系中获得体细胞胚以来，植物组织培养技术得到了迅速发展。随着组织培养技术的不断完善，使得生物技术在育种上的应用成为了可能，大大加快了我国牧草育种的进展［2］。王发生等［3］对紫花苜蓿愈伤组织诱导及植株再生做了详细研究。但是，在植物组织培养过程中超度含水态苗［4，5］，由于其难以移栽成活，严重影响植物组织培养技术的发展和应用。1981年Debergh等［6］提出了试管植物“玻璃化作用”的概念。陈兵先等［7］对植物组织培养中玻璃化现象做了详细报道。

通过组培体系获得转基因植株，是目前生物技术手段改良植物品种的途径之一，而组培过程中出现的污染，褐化和玻璃化是影响植物组培体系建立的3大难题［8］，随着转基因技术的发展，组培体系显得尤为重要。陶铭［9］通过研究发现导致再生苗玻璃化的原因主要有培养基、培养容器、环境条件及外植体种类等，但其诱发机理至今尚无定论。李云霞等［10］以新疆大叶，甘农三号和陇东苜蓿为试材，对紫花苜蓿组培体系中常见褐化原因进行了分析并提出了解决办法。吴丽芳等［11］对紫花苜蓿组织培养中常见问题也提出了解决对策。……