杨 露，张全生，邓泽涛

（重庆市种畜场，重庆 400020）

精液冷冻保存是人工授精技术的一项重大革新，自冷冻精液在牛开始试验成功以来，迄今已40多年，利用冷冻精液解冻后进行输精已成为许多国家作为人工授精的主要方法。目前，有些国家的精液冷冻技术发展到崭新的工厂化阶段。牛的冷冻精液在生产中得到了大力推广和应用。而猪的冷冻精液至今仍处于实验阶段，究其主要原因是解冻后精子复苏率较低，异常精子多，受胎率低于正常水平。

1 精液的冷冻

1.1 冷冻的原则

冷冻过程中的精细胞不但要对保存温度（-196 ℃）有耐受能力，而且要能经受从射精时肌体体温到保存时超低温度的变化，且活率不能过度降低。因此，后者比前者显得更重要，每种细胞都有它理想的冷冻与解冻速度。第一，冷冻速率太慢时，与冷冻保护剂接触时间过长，精子容易受冷冻保护剂的化学损伤作用而死亡或遭受破坏。第二，冷冻速率过快时，细胞内液体易导致结冰现象，对细胞造成物理或化学伤害。解冻原理恰好相反。

表1 猪精液常用冷冻剂稀释液成分表

1.2 稀释液的配制原则

第一，配制稀释液所使用的一切用具，必须经认真清洗和严格消毒。第二，稀释液要现用现配，保持新鲜，经密封、消毒的稀释液，允许在0～5 ℃的冰箱中保存1周。但卵黄、抗生素、酶、激素等有生物活性的物质必须在用前时临时添加。第三，稀释用水应为蒸馏水或重蒸馏水，要求保持新鲜、中性。 第四，配制稀释液所用的化学制剂要纯净，一般要求化学纯或分析纯；……