HPLC法测定跳骨片中血竭素的含量
2012-05-08邱晓晖刘华英黄汉伟
邱晓晖刘华英黄汉伟
HPLC法测定跳骨片中血竭素的含量
邱晓晖1刘华英2黄汉伟2
目的建立HPLC法测定跳骨片中血竭素含量的方法。方法采用反相C18柱,乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠(35:45),用磷酸调PH值为3.14为流动相,检测波长:440nm,流速:1.0ml/min。结果血竭素进样量在0.13945~0.41835g范围内,呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为99.69%。结论采用HPLC法测定跳骨片中血竭素含量具有灵敏度好,而且准确,简便,合理可行。
HPLC;血本竭素;含量测定
血竭是跳骨片处方中的主要组分,其所含的血竭素具有活血化瘀、祛腐生肌、消炎镇痛、止血敛疮、软坚散结的作用,为处方中的重要活性成分,我们通过查阅有关文献[1-3],采用流动相的优化法,进行大量的实验,建立了高效液相色谱法测定本品中血竭素含量的方法,并对色谱条件进行方法学研究,可以达到基本分离,灵敏度好,且具准确性。
1 仪器与试药
仪器:岛津高效液相色谱仪。试剂:乙腈(色谱纯)、甲醇(色谱纯)、磷酸二氢钠、磷酸等,其他试剂均为分析纯。对照品:血竭素高氯酸盐为中国药品生物制品检定所提供(供含量测定用),使用前置干燥器中干燥至恒重。样品:跳骨片(批号060801、060802、060803)均为自制。
2 方法与结果
2.1色谱条件色谱柱:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Chromasil C18250×4.6mm 5u)流动相:乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠(35:45),用磷酸调PH值为 3.14为流动相;检测波长:440nm,流速:1.0ml/min,柱温:40℃。
2.2阴性干扰试验对照品溶液的制备:精密称取血竭素高氯酸盐对照品20mg置10ml棕色量瓶中,加3%磷酸甲醇溶液超声2min溶解,并用甲醇稀释至刻度,摇匀,再精密量取该液1ml置25ml棕色量瓶中加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。……
