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推拿手法对家兔肌肉纤维化模型α-SMA表达水平影响的实验研究

2012-04-25罗才贵

长春中医药大学学报 2012年4期
关键词:肌性斜颈病理变化

冯 跃,杨 洁,罗 建,李 敏,罗才贵*

(1.成都中医药大学针灸推拿学院,四川 成都 610075;2.成都中医药大学附属医院 推拿科,四川 成都 610072;3.雅安市教育学院 四川 雅安 625000)

肌肉纤维化是很多肌肉软组织疾病的基本病理变化,如婴幼儿的先天性肌性斜颈、长期的肌肉劳损、放疗后局部肌肉损伤等,均有肌肉纤维化的改变,推拿在治疗上述疾病时临床疗效显著,通过推拿治疗,局部肌肉明显软化,因此,我们推断推拿手法可以减缓甚至逆转肌肉的纤维化,为了证明此推断,本实验以幼兔肌肉纤维化模型为研究对象,推拿手法干预后观察反应肌肉纤维化变化的指标,从而明确推拿治疗肌肉软组织疾病组织形态学改变的实质。

1 实验材料与方法

1.1 实验对象 品种:日本大耳白兔,来源:成都中医药大学实验室动物房采购及饲养,周龄:4~5周。共24只,雌雄各半,体质量450~550 g。随机分为3组,每组8只。

1.2 造模方法 试剂:无水乙醇(深圳市华昌化工有限公司)。造模:3组幼兔均采用无水乙醇注射右侧胸锁乳突肌进行造模。方法:助手固定好幼兔,操作者一手提起幼兔右侧胸锁乳突肌,另一手在其中段进行常规消毒,用2 mL注射器吸入无水乙醇,回抽无回血后缓慢注射,注射量按照1 mL/kg的标准,每只幼兔注射1次。造模时间:注射后1个月。

1.3 分组干预 模型1组:注射后不做任何处理,1个月后取标本(注射部位组织)进行指标检测,以确认造模是否成功。模型2组:注射后不做任何处理,作为模型对照组,2个月后取标本。推拿组:注射1个月后,采用拿揉法对造模处进行推拿。具体操作:以单手拇指指腹与食中二指指腹相对(食指与中指并拢)拿持住胸锁乳突肌注射处(有结节样改变),做吸定基础之上的回旋与提起揉动(拿揉法)。通过对操作者拿揉法运用“推拿手法测定仪”进行检测,操作中手法参数控制在:平均压1 kg,频率120次/min。每次操作5 min,每日操作1次,5次为1疗程,疗程间休息2 d,共治疗4个疗程。

1.4 统计学处理 所有资料均采用SPSS 13.0统计软件包。2组计量资料均数比较,采用成组t检验,多组计量资料均数比较,采用单因素方差分析(One-way ANOVA),多组等级资料比较采用非参数秩和检验,均以P<0.05为具有统计学意义。

2 结果

2.1 各组造模前基线比较 见表1。

表1 各组幼兔造模前体质量比较(±s)

2.2 标本送检情况 见表2。

表2 各组幼兔死亡率

2.3 SCM病理学改变

2.3.1 HE病理检测 见表3~表4。

表3 各组HE病理变化情况

表4 3个模型组纤维组织增生程度比较

2.3.2 α-SMA免疫组化测定 见表5。

表5 α-SMA阳性率比较±s %

3 讨论

本实验显示,推拿组标本HE病理检测较模型组纤维增生程度减轻,并有统计学意义(P<0.05),同时推拿组所有标本均未见α-SMA阳性率表达,与模型组比较有统计学意义。表明推拿手法可以减缓甚至逆转肌肉的纤维化改变,是推拿治疗此类疾病的作用实质。

无水乙醇是临床比较常用的传统硬化剂,在肝癌、肾囊肿等疾病的治疗中应用较为广泛。其作用机制主要为无水乙醇直接注入肿瘤内,可使肿瘤细胞及其血管的内皮细胞迅速脱水,蛋白凝固,癌细胞变性坏死,癌周血管完全闭塞,继而引起癌组织缺血坏死,纤维形成[1]。本实验模型1组在造模1个月后标本HE病理变化显示:肌细胞形态和结构呈灶性肌细胞变性、坏死,炎细胞浸润可见,纤维组织增生呈小灶性、多灶性、片状。α-平滑肌肌动蛋白(alpha-Smooth Muscle Actin,α-SMA)是肌纤维母细胞的细胞表型可靠标志性蛋白[2]。唐盛平等[3]在对相关疾病的α-SMA研究中,全面显示出该抗体阳性细胞根据肌成纤维细胞在组织器官纤维化中的作用及在该病的高表达,推测该细胞在本病的病理演变过程中扮演重要角色。本实验模型1组和模型2组均见较高阳性表达率,可见肌肉纤维化造模已成功,这种变化与推拿临床常见多种疾病的病理变化相同,比如小儿肌性斜颈。

小儿肌性斜颈的病因目前尚无定论,但其局部的病理改变是趋于统一的,即胸锁乳突肌间质增生和纤维化。刘传康等[4]研究发现成纤维细胞和成肌细胞在肌性斜颈的发病机制中具有非常重要的作用。如以成纤维细胞增殖、成熟为主,就可能发生胸锁乳突肌纤维组织大量增生,出现肌肉纤维化而临床上表现为典型的斜颈症状;如以成肌细胞增殖、分化成熟为主,就可能形成较为正常的肌肉组织而不出现斜颈的表现或肌肉部分纤维化而出现轻型斜颈的表现。

因此,本实验推拿组治疗后HE病理变化以及不见肌肉纤维增生,α-SMA亦不见阳性表达,证明推拿手法能够减轻甚至逆转肌肉纤维化,也就不难理解推拿治疗小儿肌性斜颈的临床疗效和优势。从而证明,推拿治疗各种疾病取效的机制均与此有关,但详细的关系和机制仍需我们深入研究。

[1]潘东香,潘定宇,胡军.超声引导下肝脏穿刺瘤体内注射无水乙醇治疗肝癌[J].武汉大学学报(医学版),2007,28(2):243-245.

[2]Margo GF.Colombatti amyofibroblasts and extracellular matrix glycoproteinsin palmar fibromatosls[J].General & Diagnostic Pathology,1997,142(3-4):185-190.

[3]唐盛平,刘正全,全学模,等.先天性斜颈的病理研究[J].中华小儿外科杂志,1998,19(2):96-98.

[4]刘传康,张德文.地塞米松对大鼠骨骼肌间质中成纤维细胞增殖的影响[J].儿科药学杂志,2003,9(2):18-19.

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