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白细胞介素-1β对人牙周膜成纤维细胞中MCP-1表达影响的研究

2012-02-05谭国琴侯夏沛刘育鑫

牙体牙髓牙周病学杂志 2012年11期

靳 晶,谭国琴,侯夏沛,刘育鑫,曹 军

(第四军医大学口腔医学院,陕西西安710032)

牙根吸收(root resorption)是正畸牙齿移动中常见并发症之一,但其发病机制仍不清楚[1-2]。有研究显示:发生牙根吸收的区域局部牙周组织中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达增强[3],且局部牙周组织中细胞增多[4]。那么,这种局部牙周组织中增多的细胞是否受到局部炎症牙周组织中某种趋化信号的作用呢?本研究针对这个问题进行了初步研究。

单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)是一种特异性趋化因子,对单核-巨噬细胞有很强的趋化激活作用,在趋化激活单核-巨噬细胞向炎症部位募集过程中发挥重要作用[5]。Asano等[6]在大鼠牙根吸收组织切片中发现:牙周膜成纤维细胞中MCP-1表达阳性,同时还观察到,MCP-1能刺激大鼠破骨前体细胞向破骨细胞的转化,但其具体的分子生物学机制仍不清楚。本研究分别采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫荧光技术以及Western blot方法检测不同浓度IL-1β对hPDLFs中MCP-1表达的影响,初步探讨在牙根吸收过程中,人牙周膜成纤维细胞在IL-1β介导环境下,是否存在MCP-1的过表达、引起外周血单核细胞向发生牙根吸收的牙周组织中募集的机制。

1 材料和方法

1.1 主要试剂和仪器

重组人IL-1β(Peprotech公司,美国);DMEM培养基、胰蛋白酶(Gibco公司,美国);胎牛血清(Hyclone Lab,Inc);RT-PCR试剂盒、Taq DNA聚合酶、DL2 000 marker(Takala公司,日本);兔抗人MCP-1多克隆抗体(Abcom公司,美国);山羊抗兔荧光素FITC标记抗体(北京中衫金桥生物技术有限公司);EPS 500/400电泳仪(PerkinElmer公司,美国);垂直电泳槽和电泳仪、Mini Trans-Blot转移电泳槽、Biorad PCR热循环仪(Bio-Rad公司,美国)。……

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