江苏省淮安市清浦区猪细小病毒病血清学调查
2012-02-03蒋法成陈树霞蒋锁俊
范 磊 蒋法成 陈树霞 蒋锁俊
（1江苏省淮安市清浦区动物卫生监督所，江苏省淮安市 223002；2江苏省淮安市动物疫病预防控制中心，江苏省淮安市 223001）
江苏省淮安市清浦区猪细小病毒病血清学调查
范 磊1蒋法成2陈树霞2蒋锁俊2
（1江苏省淮安市清浦区动物卫生监督所，江苏省淮安市 223002；2江苏省淮安市动物疫病预防控制中心，江苏省淮安市 223001）
为了解清浦区生猪细小病毒感染情况，作者应用ELISA试验对该区没有免疫猪细小病毒疫苗的5个乡镇的规模猪场和散养户共计133份血清样品进行抗体监测，结果显示：规模场和散养户的猪均感染猪细小病毒，被检的5个乡镇，有3个乡镇规模场和散养户检出细小病毒抗体，2个乡镇没有检出，检出率达3/5，说明该区大部分乡镇规模猪场和散养户的猪已被细小病毒污染。规模猪场和散养户抗体阳性检出率分别是8.99%和9.09%，个别乡镇阳性率高达20%，须引起高度重视。
抗体监测；猪细小病毒；清浦区；淮安
猪细小病毒病是由猪细小病毒引起妊娠母猪流产、产死胎、木乃伊胎和弱仔为特征的繁殖障碍性疾病，给养猪业造成了重大经济损失。为准确掌握猪细小病毒病在江苏省淮安市清浦区的流行动态，制定科学合理的防控方案，笔者于2012年4月份对清浦区5个乡 （镇）部分规模养殖场和散养户随机采取133份猪血清进行了血清学检测，现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1诊断试剂
猪细小病毒ELISA抗体检测试剂盒购自江苏力通生物技术有限公司，武汉科前动物生物制品有限责任公司生产，批号：111205。
1.1.2 被检血清
猪血清133份，采自清浦区城南、和平、武墩、黄码、盐河5个乡 （镇），每乡 （镇）选择1个规模猪场和3家散养户，前腔静脉采血后自然凝固，分离血清，各血清样品清亮，无溶血，置冰箱4℃保存备用。所有被检测猪场和散养户均未免疫猪细小病毒疫苗。
1.2 方法
1.2.1 配制洗涤液
将试剂盒中的浓缩洗涤液恢复至25℃左右，摇动使沉淀的盐溶解，然后用蒸馏水作20倍稀释。
1.2.2 样品稀释
在血清稀释板中按1︰40的体积稀释待检血清样品 （195μL样品稀释液中加5μL待检血清样品）。
1.2.3 对照稀释
在血清稀释板中按1︰4分别稀释阳性对照和阴性对照 （180μL样品稀释液中加60μL对照血清）。
1.2.4 检测步骤
取抗原包被板，分别将稀释好的待检血清和对照各取100μL加入到抗原包被板孔中，待检样品做1孔，阴性对照和阳性对照各设2孔。轻轻振匀孔中样品，置37℃温育30分钟。
甩掉板孔中的溶液，每孔加入稀释好的洗涤液200μL，静置3分钟倒掉，再在吸水纸上拍干，共计洗涤5次。
每孔加羊抗猪酶标二抗 100μL，置37℃温育30分钟。
洗涤5次，方法同上。每次均在干净吸水纸上拍干。
每孔先加底物液A一滴 （50μL）、再加底物液B一滴 （50μL），混匀，18℃～25℃避光显色10分钟。
每孔加终止液一滴 （50μL），10分钟内测定结果，测定前在震荡器上轻轻震动一下。
1.3 结果判定
在酶标仪上测各孔 OD630nm值。试验成立的条件是阳性对照孔平均OD630nm 值≥0.6， 阴性对照孔平均OD630nm 值必须＜0.3。 样品 OD630nm值≥0.4，判为阳性；样品OD630nm值＜0.4，判为阴性。
2 监测结果
监测结果详见表1、表2。
3 讨论
3.1 监测结果分析
本次监测的生猪，都是育肥猪和仔猪，没有母猪和种公猪，从监测结果可以看出，目前清浦区规模场和散养户均感染猪细小病毒，被检的5个乡镇，有3个乡镇均检出细小病毒抗体，2个乡镇没有检出，检出率达3/5，说明大部分乡镇猪场和散养户已被细小病毒污染。通过对阳性率较高的乡镇进行跟踪调查，现其规模场中母猪流产、产死胎等临床症状较多，这可能与猪细小病毒病感染有关。同时在散养户中检出了阳性抗体猪只，说明该病已经在本地扩散蔓延。
清浦区规模化养殖场和散养户未经免疫猪只的细小病毒病抗体阳性检出率分别是8.99%和9.09%，两者抗体阳性率差异不显著 （P＞0.05），个别乡镇阳性率高达20%，须引起高度重视。
表1清浦区各乡镇猪细小病毒病血清学检测结果
表2清浦区规模猪场和散养户猪细小病毒病感染率
33..22 感染原因分析
3.2.1检疫不严
最近几年，生猪养殖经济效益很高，清浦区大量从外地引进种猪和仔猪，由于检疫不严格而将疫病引入。
3.2.2猪场污染情况
规模猪场饲养密度大，有利于病原的传播。散养户的生猪虽然饲养密度较小，流通少，接触传染源机会小，但是，多数散养户的仔猪都是购自规模猪场和传统母猪养殖户，仔猪的出生地多已污染细小病毒，因此，散养户也检出病毒抗体就不足为奇了。
3.2.3未免疫细小病毒病疫苗
由于多数规模猪场和散养户没有认识到猪细小病毒病危害的严重性[1]，未将其纳入免疫计划范围，导致免疫抗体缺失，细小病毒乘虚而入，带毒生猪不断增多。
3.2.4缺乏监测
和平、盐河和城南3乡镇被检猪场都是饲养多年的老场，有生猪养殖的传统和历史，本次均有抗体阳性检出，可能和该地养殖时间长及检疫与消毒不够严格有关，历史上从未开展过细小病毒的监测。未检出的2个乡镇，其被检规模场都是刚建设两年的新场，其猪场选址和规划布局科学合理，消毒制度完善且落实到位，猪场管理者养殖、防疫技术水平较高。染。通过对阳性率较高的乡镇进行跟踪调查，现其规模场中母猪流产、产死胎等临床症状较多，这可能与猪细小病毒病感染有关。同时在散养户中检出了阳性抗体猪只，说明该病已经在本地扩散蔓延。
清浦区规模化养殖场和散养户未经免疫猪只的细小病毒病抗体阳性检出率分别是8.99%和9.09%，两者抗体阳性率差异不显著 （P＞0.05），个别乡镇阳性率高达20%，须引起高度重视。
3.2.1检疫不严
最近几年，生猪养殖经济效益很高，清浦区大量从外地引进种猪和仔猪，由于检疫不严格而将疫病引入。
3.2.2猪场污染情况
规模猪场饲养密度大，有利于病原的传播。散养户的生猪虽然饲养密度较小，流通少，接触传染源机会小，但是，多数散养户的仔猪都是购自规模猪场和传统母猪养殖户，仔猪的出生地多已污染细小病毒，因此，散养户也检出病毒抗体就不足为奇了。
3.2.3未免疫细小病毒病疫苗
由于多数规模猪场和散养户没有认识到猪细小病毒病危害的严重性[1]，未将其纳入免疫计划范围，导致免疫抗体缺失，细小病毒乘虚而入，带毒生猪不断增多。
3.2.4缺乏监测
和平、盐河和城南3乡镇被检猪场都是饲养多年的老场，有生猪养殖的传统和历史，本次均有抗体阳性检出，可能和该地养殖时间长及检疫与消毒不够严格有关，历史上从未开展过细小病毒的监测。未检出的2个乡镇，其被检规模场都是刚建设两年的新场，其猪场选址和规划布局科学合理，消毒制度完善且落实到位，猪场管理者养殖、防疫技术水平较高。
表1清浦区各乡镇猪细小病毒病血清学检测结果
表2清浦区规模猪场和散养户猪细小病毒病感染率
4 防控对策
4.1 强化疫病检疫
本病尚无有效治疗方法，只能采用对症疗法，预防本病最有效的方法是坚持自繁自养。必须要从场外进猪时应加强检疫，血清学检测为阴性方可引进，引进隔离观察2周后再进行1次检测，证实为阴性后再混群饲养。
4.2 加强猪场净化
感染猪场应将发病母猪、仔猪淘汰，并用血清学方法对全群进行检查，对检测阳性猪应采取隔离或淘汰[2]，猪场环境、用具，严格消毒。
4.3 及时科学免疫
根据猪场抗体水平监测情况，确定首免时间，间隔3周再加强免疫，有良好的预防效果。
4.4 做好疫病监测
由于猪场中各种潜伏疫病引起猪的免疫抑制，从而导致其它疫病相继发生，长期监测，并采取恰当的措施是十分必要的。尤其是规模化养猪场，一定
本病尚无有效治疗方法，只能采用对症疗法，预防本病最有效的方法是坚持自繁自养。必须要从场外进猪时应加强检疫，血清学检测为阴性方可引进，引进隔离观察2周后再进行1次检测，证实为阴性后再混群饲养。
感染猪场应将发病母猪、仔猪淘汰，并用血清学方法对全群进行检查，对检测阳性猪应采取隔离或淘汰[2]，猪场环境、用具，严格消毒。
根据猪场抗体水平监测情况，确定首免时间，间隔3周再加强免疫，有良好的预防效果。
由于猪场中各种潜伏疫病引起猪的免疫抑制，从而导致其它疫病相继发生，长期监测，并采取恰当的措施是十分必要的。尤其是规模化养猪场，一定要定期进行疫病监测，及时了解猪场疫病流行病学情况和疫苗的免疫效果，同时实行严格的生物安全措施，做好各种疫病的预防和控制工作[3]。要定期进行疫病监测，及时了解猪场
[1]邓位喜，涂丽君，曾贵英，等.遵义地区猪细小病毒病的血清学调查.猪业科学，2008（2）：25.
[2]高洪，赵强，立陆勇，等.贵州省桐梓县猪细小病毒病的血清学调查.畜牧兽医科技信息，2010（2）：32.
[3]杜宗沛，吴植，解慧梅，等.江苏中部地区3个种猪场主要疫病的调查及应对方略.中国兽医杂志，2011，47（8）：47-48.
S858.285.3
C
1673-4645（2012）07-0030-02
