王 薇，郑汉平，廖祥茹

复方双氯芬酸辣椒巴布贴含有双氯芬酸二乙胺、辣椒碱、冰片等，有较强的抗菌作用。依据《中国药典》2010年版［1］，本文采用薄膜过滤法对复方双氯芬酸辣椒巴布贴进行细菌、霉菌及酵母菌计数的验证，去除其抑菌成分，使加菌回收达到满意的效果。

1 验证材料

1.1 样品 复方双氯芬酸辣椒巴布贴:规格: 1%，批号:20090118、20090510、20091115，广州军区武汉总医院药剂科制剂室生产。

1.2 仪器 HTY-2000集菌仪、可拆卸式薄膜过滤器(杭州高得医疗器械有限公司)，微孔滤膜:孔径0.45 μm(杭州泰林生物技术设备有限公司)，SW-CJ-IFD/T型洁净工作台、BSC-1300ⅡA2型生物安全柜(苏净集团安泰公司生产)，PYX-DHS隔水式电热恒温培养箱(上海市跃进医疗器械厂)，SPX-250B-Z生化培养箱(上海博讯实业有限公司医疗设备厂)。

1.3 培养基 营养琼脂培养基(批号:101130)、玫瑰红钠琼脂培养基(批号:100114)、营养肉汤培养基(批号:101213)、胆盐乳糖增菌液(批号: 091029)、改良马丁培养基(批号:1010122)、溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基(批号:081219)，北京三药科技开发公司，甘露醇氯化钠琼脂培养基(国药集团化学试剂有限公司，批号:20090713)，蛋白胨(天津市英博生化试剂有限公司，批号: 051209)。

1.4 稀释剂 pH 7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液、0.9%无菌氯化钠溶液，按中国药典2010年版二部附录方法配制。

1.5 菌种 大肠埃希菌(Escherichia coli)［CMCC(B)44102］第4代，金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)［CMCC(B)26003］第4代，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)［CMCC(B)63501］第4代，白色念珠菌(Candida albicans)［CMCC(F) 98001］第3代，黑曲霉(Aspergillus niger)［CMCC (F)98003］第4代，铜绿假单孢菌(Pseudomonas aeruginosa)［CMCC(B)10104］第3代。

2 菌液制备方法

接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，置……