一株拟南芥镉敏感突变体的筛选及表型分析
2012-01-11裴雁曦龚泽华李亚伟乔增杰穆遥
山西大学学报(自然科学版) 2012年2期
裴雁曦,龚泽华,李亚伟,乔增杰,穆遥
(山西大学 生命科学学院,山西 太原 030006)
一株拟南芥镉敏感突变体的筛选及表型分析
裴雁曦,龚泽华,李亚伟,乔增杰,穆遥
(山西大学 生命科学学院,山西 太原 030006)
利用不同浓度梯度的CdCl2对拟南芥Col-0生态型进行处理,确定了筛选镉敏感突变体的适合浓度为90 μmol/L.以镉对幼苗根长生长抑制程度为指标,对拟南芥化学诱导激活标签(XVE)T-DNA插入突变体库种子进行筛选.首先在不含有雌激素的1/2 MS培养基进行大规模筛选,挑选根长抑制明显的植株,单株收取种子.在T3代复筛过程中用含有浓度为90μmol/L CdCl2的1/2 MS固体培养基筛选到一株敏感突变体csr-2.并进行了雌二醇诱导过表达表型验证.运用TAIL-PCR技术确定该植株的T-DNA插入位点位于At2g36130,并对该基因的序列进行了初步的生物信息学分析.
拟南芥;突变体筛选;T-DNA插入突变体;镉
随着工业化的迅速发展,人类赖以生存的土壤受到重金属的严重危害,威胁人类健康.重金属污染已经成为全球面临的环境问题[1].镉(Cd)是生物毒性最强的重金属元素,居五种重金属Cd、Hg、Pb、Cr、As污染之首[2],作为一种非必须元素,即使在低浓度下也会对植物根的生长造成影响[3].镉污染周期长、移动快、毒性高、难降解,被镉污染的土壤会对植物生长发育、膜系统、根系、光合作用造成伤害[4].因此研究镉污染是当下急需解决的环境问题之一[5].
拟南芥(Arabidopsisthaliana)作为一种基因组背景清晰的模式生物,具备生长周期短,基因组小等优点,是非常方便的基因功能研究……
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