仪慧兰，吕品，吴丽华

（山西大学 生命科学学院，山西 太原 030006）

转MT工程菌的构建及其对重金属的抗性研究

仪慧兰，吕品，吴丽华

（山西大学 生命科学学院，山西 太原 030006）

利用重叠延伸PCR技术克隆金属硫蛋白（MT）和绿色荧光蛋白（GFP）基因片段，并将两基因融合连接构建重组表达载体，采用氯化锂法转化毕赤酵母，获得工程菌株.荧光显微镜观察发现，工程菌在蓝光激发下发出绿色荧光，说明GFP基因被正确表达.在培养基中加入一定浓度的铜（1.0 mmol／L，1.5 mmol／L）、铬（150μmol／L，200μmol／L）、镉（120μmol／L，140μmol／L）、砷（40μmol／L，60μmol／L）化合物后，对照菌生长抑制，转基因菌株长势明显好于对照菌，表现出对金属离子的耐受性，说明工程菌过表达MT能够增强宿主对重金属离子的耐受性，提高菌株耐污能力，在微生物法净化重金属废水中具有一定优势.

金属硫蛋白;绿色荧光蛋白;重叠PCR;重金属抗性

近年来，随着城市化进程的加快和工业的迅猛发展，大量未经处理的工业废水、城市垃圾和生活污水不断排入环境中，使水体中的重金属含量急剧升高.我国各大江河湖库均受到不同程度的重金属污染，底质污染率高达80.1%，而且已经影响到水体的质量［1］.通过饮用重金属超标水，或食用重金属超标的蔬菜和粮食等，使人体摄入过量重金属元素，机体代谢受到干扰，出现各种急性和慢性疾病.调查显示，全球饮用水中约80%无法达到卫生标准，在所有已知的人类疾病中70%～80%与水污染有关［2］.因此，对重金属污染的治理显得尤为重要.

金属硫蛋白（Metallothionein，MT）是一类富含半……