院海英，徐芳，吕新华，崔百明，黄先忠

（石河子大学生命科学学院／石河子大学农业生物技术重点实验室，石河子832003）

小拟南芥高盐胁迫诱导cDNA文库的构建与测序分析

院海英，徐芳，吕新华，崔百明，黄先忠

（石河子大学生命科学学院／石河子大学农业生物技术重点实验室，石河子832003）

以新疆小拟南芥为材料，分离了小拟南芥经500mmol／L NaCl胁迫处理的幼苗总RNA，采用改良的SMART cDNA合成方法合成第一链cDNA，采用LD PCR的方法合成第二链cDNA，经BP反应重组到入门载体pDONR207上，构建了小拟南芥高盐胁迫的入门cDNA文库。文库插入片段平均大小为1.1kb，阳性克隆率为94%。文库经随机挑选克隆测序，生物信息学分析初步获得了10个有功能的基因，其中包含各种酶如水解酶、氧化还原酶等；功能蛋白如离子运输通道蛋白、胁迫诱导蛋白，细胞色素蛋白及激素受体蛋白基因等。可以利用入门文库构建各种目的cDNA文库，本研究为将来从小拟南芥中筛选耐盐基因奠定了基础。

新疆小拟南芥；耐盐；入门文库；表达文库；BP重组

早春短命植物，在新疆分布丰富。由于其生活史短，具有一定的抗寒、抗旱、耐盐碱能力，而备受关注。小拟南芥（Olimarabidopsis pumila）为无苞芥属（Olimarabidopsis），其亲源关系与模式植物拟南芥十分接近［1－2］，且比拟南芥具有更好的耐盐性能［3－5］，从小拟南芥中挖掘耐盐相关基因，并进行相关功能研究，不仅能丰富植物响应高盐胁迫的分子机理，也可利用耐盐基因培育耐盐作物品种。

对于基因组序列未知的物种，构建全长cDNA文库，是进一步开展分子生物学研究的基础。……