刘学东，王志亮，包振民

（1.中国海洋大学海洋生物遗传与种质工程实验室，山东青岛266003；2.青岛市市立医院呼吸科，山东青岛266003；3.中国农业部动物检疫所外来病中心，山东青岛266033）

禽流感病毒抗原表位分析及H5N1亚型基因工程疫苗设计＊

刘学东1，2，王志亮3，包振民1＊＊

（1.中国海洋大学海洋生物遗传与种质工程实验室，山东青岛266003；2.青岛市市立医院呼吸科，山东青岛266003；3.中国农业部动物检疫所外来病中心，山东青岛266033）

以亚洲地区H5N1亚型禽流感病毒（Avian Influenze Virus）流行株为研究对象，利用计算机软件，对同源性较高的HA1（Hemagglutnin，HA，血凝素）和NP（Nucleocapsid protein，核衣壳蛋白）进行全基因序列分析，优选出HA1蛋白的主要T细胞表位和B细胞表位，以及NP蛋白的主要CTL（Cytotoxicity T lymphocyte，细胞毒性T淋巴细胞）表位。依据这些优选表位，设计了禽流感病毒H5N1亚型基因工程疫苗。构建了基因工程疫苗表达载体pRSET－AIV，外源基因能够在大肠杆菌表达系统中得到良好表达。表达产物免疫小鼠后，血清中Ig A和IgG抗体水平明显上升，在体外培养脾细胞可产生IL－2、IL－4和IFN－γ细胞因子。验证了该H5N1亚型基因工程疫苗的抗原性，证实该基因工程疫苗在免疫小鼠体内激发体液免疫的同时调动了细胞免疫。

禽流感；基因工程疫苗；抗原表位；H5N1

禽流感（Avian Influenze，AI）是1种禽类的烈性传染病，人类也是禽流感病毒的易感宿主。目前疫苗的研究和应用是控制禽流感的主要措施。其中禽流感表位疫苗的研究是最为主要的热点［1－2］，禽流感病毒表面蛋白HA上有很多抗原表位［3］，能特异地与T细胞抗原受体（T cell receptor，TCR）和B细胞抗原受体（B cell receptor，BCR）结合的T细胞表位和B细胞表位［4－5］。……