张永亮，武安泉，盛东峰，张 杰

（周口师范学院 生命科学系，河南 周口 466001）

野桑蚕漆酶基因克隆、序列分析及转录表达谱研究

张永亮＊，武安泉，盛东峰，张 杰

（周口师范学院 生命科学系，河南 周口 466001）

利用RT－PCR方法，克隆了野桑蚕Bombyx mandarina漆酶基因，获得了其cDNA序列.该序列长2 317bp，含有一个2 295bp的完整开放阅读框，有8个外显子，7个内含子，编码一个由764个氨基酸残基组成的蛋白质，其蛋白质的分子量和等电点分别为84 340.91和6.61.推导的氨基酸序列与其它鳞翅目昆虫（Laccase）基因相应氨基酸序列有较高的同源性，该序列具有它们的漆酶基因所共有的典型特征.组织特异性表达分析表明了该基因仅在野桑蚕的表皮、头部、中肠和血液中有表达.这些结果为进一步研究野桑蚕漆酶基因的功能提供了分子基础.

野桑蚕；漆酶基因克隆；序列分析；转录表达

漆酶（Laccase）是一种含铜离子结合位点的多酚氧化酶，能够催化酚类物质氧化形成醌，将氧还原成水，醌和自由基产物一起经过非酶促耦合反应生产黑色素［1-2］.它广泛存在于生物体内，人们已从植物、细菌和真菌等中提取了漆酶，并对其结构、性质及功能进行了研究［3-11］，但对昆虫漆酶的研究报道极少.漆酶主要参与昆虫表皮的硬化过程，对昆虫的成活至关重要［12］.迄今尚未见有关野桑蚕漆酶基因的研究报道，本实验通过对野桑蚕漆酶基因的克隆、序列分析及转录表达谱研究，旨在为进一步了解该基因的功能奠定基础.

1 材料与方法

1.1 实验材料

野桑蚕……