张 燕 武庆平 姚尚龙

(华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉科,武汉 430022)

周期性机械牵张对肺泡Ⅱ型上皮细胞Cyr61表达的影响

张 燕 武庆平 姚尚龙＊

(华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉科,武汉 430022)

目的 研究周期性牵张肺泡Ⅱ型上皮细胞株A549细胞对Cyr61表达的影响。方法 对肺泡Ⅱ型上皮细胞株A549细胞施加周期性机械牵张应力。加载频率0.5H z,加载时间2 h,加载应力分别为5%,15%,30%。加载应力为15%,加载频率0.5Hz,加载时间分别0,15min,30min,60min,120min。每个实验均设立空白对照即不给予机械应力。用PCR法测定Cyr61mRNA的表达,用western法测定Cyr61蛋白含量。结果 随着加载应力的增加和加载时间的延长,Cyr61蛋白含量和mRNA表达均增加(P<0.05);施加不同加载幅度后,Cyr61蛋白含量和mRNA表达均增加(P<0.05)。结论 肺泡Ⅱ型上皮细胞IL-8的产生和释放与周期性的机械牵张应力呈强度和时间依赖性。

周期性牵张; Cyr61; 肺泡上皮细胞

对于呼吸功能严重受损的病人,机械通气是一种必不可少的治疗手段。但最近二十多年逐渐发现,机械通气治疗其实是一把双刃剑,在提供了一种有效的呼吸支持治疗的同时,还能导致肺部严重的损伤,即机械通气所致的肺损伤(ventilator-induced lung injury,VILI)[1]。Cyr61 (cysteine-rich 61,CCN1)是PDEF或转化因子刺激小鼠成纤维细胞产生的细胞因子,因富含半胱氨酸而被命名,它是CCN家族第一个被克隆的基因也是最具代表性的一员。近几年研究表明,Cyr61与机械通气相关性肺损伤密切相关[2]。本研究旨在通过研究周期性牵张对肺泡 Ⅱ型上皮细胞株 A549细胞Cyr61表达的影响,为进一步研究Cyr61与机械通气所致肺损伤的机制奠定基础。

材料和方法

1.材料和试剂

肺癌A549细胞由协和医院中心实验室提供;Cyr61单克隆抗体购于RD公司。

2.细胞培养

肺癌A549细胞由协和医院中心实验室提供,置于含10%胎牛血清的DMEM培养基中,于恒温恒湿CO2孵育箱内孵育过夜。……