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人胚嗅鞘细胞诱导神经干细胞分化的研究

2011-10-07滕晓华潘林香

湖南师范大学学报(医学版) 2011年2期
关键词:检测

刘 波,滕晓华,段 答,周 蓉,潘林香,卢 明

(湖南师范大学第二附属医院,解放军第163医院神经外科,湖南 长沙 410003)

二十世纪九十年代神经干细胞的发现使得人们对中枢神经系统的发育、神经的再生等都有了新的认识,人们对干细胞的了解也将更加全面。神经干细胞的研究仍处于初级阶段,神经干细胞的定向分化仍有较大的难度。嗅鞘细胞(OECs)兼具星型胶质细胞、少突胶质细胞和神经膜细胞的特点,由于其对中枢神经的再生具有促进作用,近年来受到研究人员的高度重视,被广泛用于中枢神经系统损伤的细胞移植研究。本实验利用嗅鞘细胞的上清液中多种成分诱导神经干细胞分化,观察其神经干细胞分化的方向,分化后的存活和电活动情况。

3.3 目前螺虫乙酯在苹果树、梨树、柑橘树和番茄上进行了登记,在在猕猴桃上没有进行登记。推荐在苹果树上的施药方式为3000~4000倍液喷施,在梨树和柑橘树上的推荐剂量为4000~5000倍液,安全间隔期分别为21 d、21 d和20 d;最多施用次数均为2次。本实验以3000倍液稀释液喷施2次,28 d后,猕猴桃中螺虫乙酯母体的残留量为0.06 mg/kg,远高于我国制定的0.02 mg/kg的最大残留限量值。因此螺虫乙酯在猕猴桃中施用合适剂量还有待进一步研究。

1 材料和方法

1.1 主要试剂

DMEM/F12(1:1)、DMEM、B27 添加剂、重组人bFGF、EGF购自 Gbico公司,FBS购于 Hyclone公司,小鼠抗人Nestin、NGFR p75抗体、小鼠抗人NSE抗体为abcam公司产品;tunnel试剂盒购自merck公司,人胚(16周)为经患者同意本院流产的胎儿。

1.2.1 嗅鞘细胞培养和鉴定

嗅鞘细胞在接种后24 h几乎全部贴壁,呈球形。……

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