DFOG对A549细胞生长及FoxM1表达的影响

2011-10-07魏桂蓉姜新萍刘争鸣

湖南师范大学学报(医学版) 2011年4期

魏桂蓉，姜新萍，徐瑾，刘争鸣

（娄底市中心医院药剂科，湖南娄底 417000）

肺癌是一种最常见的恶性肿瘤，已成为癌症死亡的首要原因，其发病率和死亡率近年来呈现上升趋势，肺癌的防治是2l世纪全世界面临的严峻人类健康问题[1]。已有研究表明，7-二氟甲氧基-5,4′-二-正辛烷氧基金雀异黄素 (7-difluoromethoxyl-5,4'-di-n-octylgenistein,DFOG)具有较先导化合物金雀异黄素(genistein,GEN)更强抗肿瘤活性[2-4]。本文观察DFOG抑制人肺癌A549细胞生长作用，并探讨其作用机制是否涉及调节转录因子FoxM1表达。

1 材料与方法

1.1 药品与试剂

DFOG按照文献[5]方法制备，分子量544，性状：黄色粉末，纯度98%。GEN(美国Sigma公司)、碘化丙啶 (PI,美国Sigma公司)、DMEM培养基 (Gibco公司)、小鼠抗人FoxM1和β-actin抗体以及辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG抗体 (美国Santa Cruz公司)购自湖南科泰生物技术公司(中国长沙市)。

1.2 细胞培养

人肺癌A549细胞购于中国典型培养物保藏中心（中国武汉市），用含10%小牛血清的DMEM培养基，加100 U/mL青霉素，100 U/mL链霉素，置于37℃，5%CO2及饱和湿度培养箱中培养，取对数生长期细胞用于实验。

1.3 PI染色FCM分析

参照先前文献[6]的方法，取对数生长期A549细胞，以每孔2×106个细胞接种于6孔细胞培养板培养24 h，待细胞贴壁后，加入含1%FCS的培养基，培养24 h(细胞周期同步化处理)，溶媒对照组，加入含0.1%DMSO的培养基；先导化合物对照组，加入含40.0 μmol/L GEN的培养基；实验组，加入含2.0、4.0、8.0 μmol/L DFOG 的培养基处理 24 h。将悬浮和贴壁细胞一并收集于1.5mL EP管中，用4℃的75%乙醇固定24 h后，经碘化丙啶（PI）染色，用EPICS-XL型流式细胞仪测定细胞DNA含量。