刘胜姿，刘英姿，全梅芳，谭宇婷，周 源

（湖南师范大学医学院，湖南 长沙 410013）

白杨素是从多种植物、蜂胶和蜂蜜中提取的一种具有广泛生物活性的黄酮类化合物，实验证明白杨素具有广谱抗肿瘤活性，但因其在肠道吸收甚少，并且5,7-位羟基在体内易被迅速糖基化代谢以致活性降低，使其临床应用受到限制[1]。有研究显示，无羟基的黄酮结构分子能有效促进HT-29细胞的分化和凋亡[2]，证明羟基并不是白杨素抗肿瘤作用所必须的基团。Wen等证明，多酚类化合物甲基化后肠道吸收率更高，肝代谢更稳定，更有利于开发成有效的抗癌药物[3]。我们先前的实验研究也发现，与先导化合物白杨素相比，5,7-二甲氧基白杨素对体外培养的人胃癌SGC-7901细胞和人结肠癌HT-29细胞生长具有更强的抑制作用[4]。

14-3-3σ是14-3-3蛋白家族中的一个成员，作为一个细胞周期负调控因子，14-3-3σ的活化可以引起细胞周期G2/M期阻滞从而发挥抑癌基因的作用[5]。而14-3-3σ基因的缺乏或甲基化失活在乳腺癌的发病中起着重要作用[6]。我们的预实验表明，MDA-MB-453细胞株为一株14-3-3 σ基因甲基化失活的人乳腺癌细胞株。本文旨在研究自主设计合成的新型白杨素类似物5,7-DMF诱导人乳腺癌MDA-MB-453细胞凋亡作用，并探讨其调控过程是否与DMF通过表观遗传学机制抑制14-3-3σ基因甲基化和上调14-3-3σ蛋白表达，复活14-3-3σ基因功能有关。

1 材料与方法

1.1 试剂

5,7-二甲氧基黄酮 (5,7-DMF,Sigma公司;分子量:282,性状:白色粉末,纯度：98%)；5-氮杂胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-CdR,Sigma公司)；碘化丙啶(PI,Sigma 公司)；TRIzol(美国 Invitrogen公司)，基因组提取和逆转录试剂盒 (美国Promega公司)，14-3-3σ 和 β-actin 单克隆抗体(美国 Santa Cruz公司)。……