荧光光谱法研究橙皮素与牛血清白蛋白的相互作用*
2011-09-24尚永辉
尚永辉
(咸阳师范学院 化学与化工学院,陕西 咸阳712000)
科研与开发
荧光光谱法研究橙皮素与牛血清白蛋白的相互作用*
尚永辉
(咸阳师范学院 化学与化工学院,陕西 咸阳712000)
采用荧光光谱技术研究了橙皮素与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。研究发现橙皮素对BSA的荧光猝灭属于静态猝灭过程,由热力学参数焓变△r H m=-60.543 kJ·mol-1,熵变△r S m=-114.121J·mol-1均小于零,判断橙皮素与BSA之间主要靠氢键和范德华力相结合,生成自由能变(△r G m)为负值,表明橙皮素与BSA的作用过程是一个自发过程;并应用同步荧光光谱考察了橙皮素对BSA构象的影响。
橙皮素;牛血清白蛋白;荧光光谱
Abstract:The interaction behavior between Hesperetin and Bovine Serum Albumin(BSA)was studied by fluorescence spectroscopy.The quenching constants were obtained at 292K,299 K,311K and 315t K,the results indicated that the fluorescence quenching mechanism for BSA through Hesperetin binding is likely a static quenching process.The thermodynamic parameters,enthalpy change (△r H m)and entropy change(△r S m),were calculated to be-60.543 kJ·mol-1<0,and-114.121J·mol-1<0,respectively,which indicated that the interaction of Hesperetin with BSA was driven mainly by hydrogen bond and Van der Walls force.The process of binding was a spontaneous process in which Gibbs free energy change(△r G m)was negative.The effect of Hesperetin on the conformation of BSA was analyzed using synchronous fluorescence spectroscopy.
Key words:Hesperetin;Bovine Serum Albumin(BSA);fluorescence spectroscopy
药物进入人体首先与血清白蛋白结合,通过血浆的存储和运输到达受体部位产生药理作用[1]。因此,从不同角度研究蛋白与药物分子间的相互作用已成为目前药物研究的热点问题之一。荧光光谱法是目前研究蛋白质与各种小分子以及离子相互作用的重要手段之一,通过研究,可获得蛋白质分子中荧光生色基团结构和所处微环境及其分布情况等信息,同时还可得到外源物质与生物大分子相互作用的有关数据。
橙皮素(Hesperetin)属于双氢黄酮类化合物,能有效抑制脂肪分解,促进DNA生物的合成,具有健胃、祛痰、镇咳、利尿以及抗氧化、抗肿瘤等多种功效。实验在pH值为7.40的Tris-HCl介质中运用荧光光谱技术研究了橙皮素与BSA的相互作用,并对其作用机理进行了初步分析。
1 实验部分
1.1 试剂与仪器
牛血清白蛋白(Amresco.0930,分子量:65000);橙皮素(中国药品生物制品检定所);……
