孙 勇 宋广德

嗅癌犬使用方法初探

孙 勇 宋广德

癌症患者呼出的气体中含有烷类和苯类衍生物，精确地探测这些化合物，现有的各种化学方法都难以做到，而通过犬的灵敏嗅觉却可以识别，使用训练良好的嗅癌犬筛查肺癌病患具有可行性，可以作为肺癌临床辅助诊断的有效方法。为了充分利用嗅癌犬对肺癌病人气味鉴别阳性率，合理避开对健康人群的假阳性率，并且使出具的结论科学客观，在嗅癌犬的使用上，先以一例确诊肺癌病人口腔呼出气味作为检验嗅源（标准气味），检验嗅癌犬是否具备正常的工作状态，再用3头嗅癌犬分别对1例被检测者和5例健康志愿者的口腔呼出气味进行对比鉴别，用3头犬结论的百分率出具被检测者是否具有肺癌病患的筛查结果，以此阐述嗅癌犬的使用方法以及讨论其可行性。

一、名词界定

二、材料

（一）嗅癌犬3头：拉布拉多犬1头，史宾格犬2头。

（二）一例被检测者口腔呼出气味一式2份。

（三）5位健康志愿者口腔呼出气味10份（每位2份）。

（四）一例确诊肺癌病人（志愿者）口腔呼出气味一式2份。

（五）其他材料：嗅癌犬工作间、鉴别台、不锈钢杯、带孔杯盖、不锈钢镊子、大、小广口瓶、医用纱布、无菌手套、口罩、密封袋、网球、秒表等。

嗅癌犬 本研究将其定义为一种经过特殊训练的，通过筛查人的口腔呼出气味来认定该人是否患有肺癌的工作犬。检验嗅源(A/B) 吸附了确诊肺癌病人（志愿者）的口腔呼出气味的无菌纱布。送检物(P/Q) 吸附了被检测者口腔呼出气味的无菌纱布。配物(A1/A2…，B1/B2…) 吸附了健康人（志愿者）的口腔呼出气味的无菌纱布。被 鉴 物 (A/B，P/Q，A1/A2…B1/B2…)供嗅癌犬鉴别的吸附了人口腔呼出气味的无菌纱布，是嗅源、送检物、配物的统称。鉴别台 一种供嗅癌犬工作的6孔平台。每孔内可摆放一个被鉴物，由左至右排序为孔1、孔2、孔3、孔4、孔5、孔6。

三、方法

（一）气味提取

在专业人员的指导下，被提取人在清洁的室内环境，当天无吸烟行为，饭前半小时，用清水漱口3遍，带无菌手套，用手将10cm2方块状无菌纱布，竖直展平，紧贴在口前，用鼻吸气，用口呼气，自然呼吸1分钟，轻咳（无痰渍）3下，使纱布充分吸附口腔呼出气味。（二）气味编号和保存

气味提取后，专业人员用镊子将纱布放入密封容器封口、编号，避光、常温保存。编号记录的是被提取人姓名、提取序号、性别、提取时间等，如SUNYONG 000001M 20090818B，SUNYONG表示姓名，000001表示提取序号，M表示男性（女性为W），20090818表示2009年8月18日提取，B表示早餐前（L表示午餐前，D表示晚餐前）。气味保质期将在以后研究中探讨，本研究暂定为避光、常温下3天。

（三）气味分组

1. 将2份确诊肺癌病人口腔呼出气味制作成2份检验嗅源。标号为检验嗅源A、检验嗅源B（备用，以防嗅源A被污染，以下“备用”目的相同）。

2. 将2份被检测者口腔呼出气味标号为送检物P、送检物Q（备用）。

3. 将5位健康志愿者随机排序，将其口腔呼出气味用代码表示，第1位的2份气味代码为配物1A、1B，第2位的代码为配物2A、2B，以此类推，配物3A、3B，配物4A、4B，配物 5A、5B。

4. 将检验嗅源A与配物1A、配物2A、配物3A、配物4A、配物5A共6个气味制作成气味组M，用来检验嗅癌犬是否处于正常工作状态。

5. 将送检物P与配物1B、配物2B、配物3B、配物4B、配物5B共6个气味制作成气味组N，用来正式筛查。

6. 同组气味中，各气味的提取、保存条件和保存时间应相同。气味分组见下表：

（四）嗅癌犬编号

随机将嗅癌犬编号为嗅癌犬①、嗅癌犬②、嗅癌犬③。

（五）检验嗅癌犬是否处于正常工作状态和配物的有效性。

1. 将气味组M中6个气味随机摆入鉴别台6个孔中，令嗅癌犬进入鉴别台，进行未知筛查并用秒表计时。嗅癌犬在1分钟内果断认定检验嗅源A，证明该犬处于正常工作状态，可以进行下一步对被检测者的筛查。

2. 如嗅癌犬1分钟内没有找出检验嗅源A或认定错误，则筛查停止，认定该犬没有处于筛查肺癌的正常工作状态，不进行对被检测者的筛查工作。

气味组 被鉴物 配物M 检验嗅源A 1A 2A 3A 4A 5A N送检物P 1B 2B 3B 4B 5B

3. 如3头犬均对同一配物作出认定，则该配物不具备有效性，更换该配物，重新操作。

（六）经过检验正常的嗅癌犬对被检测者的筛查

1. 气味组N中6个气味随机摆入鉴别台6个孔中，令嗅癌犬进入鉴别台，进行未知筛查并用秒表计时。嗅癌犬在1分钟内果断找出送检物P位置，证明该犬认定送检物为肺癌气味，筛查结论为阳性。

2. 如筛查持续时间到1分钟时，犬还不能认定送检物位置，则判定该次筛查结论为阴性。

3. 如嗅癌犬进入鉴别台在1分钟内，没有认定送检物P，而是认定配物，则剔除该配物，重新摆放被鉴物位置，计时清零，犬二次进入鉴别台进行筛查。如犬还是不认定送检物，判定该次筛查结果为阴性。

四、结果

检验结果统计如下表：

表1：检验嗅癌犬正常工作状态和配物有效性统计表

表2：嗅癌犬气味筛查统计表

表3：筛查结论统计表

五、讨论

（一）使用方法设计科学、严密，具有可行性。嗅癌犬使用前检验其正常工作状态，具有实效性；气味提取的条件限制，不对犬辨别肺癌气味造成干扰，气味分组时保证同组中各气味提取、保存条件和时间相同，保证检验嗅源、送检物、配物3者气味的可比性；气味分组、送检物摆放位置随机，具有科学性；通过3头犬未知筛查认定，用百分率出具结论，防止一锤定音，具有可判断性。条件允许，可以用多于3头嗅癌犬对1名被检测者进行筛查，结论更科学客观。

（二）基于平时训练时嗅癌犬的工作用时，筛查时间确定为1分钟，比较嗅癌犬的工作量，符合警犬技术同类专业正常用时。

（三）气味的保质期应视盛装气味容器的密封程度、摆放容器的环境温度等综合考虑，由于气味分组时考虑到同组中各气味提取、保存条件和时间相同，本研究将保质期暂定为3天，不会影响使用效果。

（作者单位：孙勇，公安部南京警犬研究所，210012；宋广德：山东省医科院附属医院，250062）

（编辑：颜 勤）

（山东省自然科学基金资助项目 Z2006C11）