邹艳丽，赵永刚，张永强，包静月，孙成友，王君玮，李金明，王志亮

（中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心，山东青岛 266032 ）

西尼罗河病毒（West Nile virus，WNV）是黄病毒科黄病毒属成员，它会引起人畜共患病[1]。因于1937年首次从非洲乌干达西尼罗河地区一名发热妇女血液中分离到而得名[2]。与日本脑炎病毒、墨累河谷脑炎病毒、圣路易斯脑炎病毒和昆津病毒同属日本脑炎病毒血清群。该病毒是蚊媒病毒，主要经库蚊传播给人、马和鸟类等，可引发西尼罗河热和致死性的西尼罗河病毒性脑膜脑炎，其中西尼罗河热被世界动物卫生组织列为重大疫病。西尼罗河病毒分布广泛，1950年埃及3名儿童的血液中分离到病毒，60年代早期第一次报道从埃及和法国的马中分离到病毒[3]。据报道，已从以色列、南非、刚果、印度等地分离到病毒，此后西尼罗河病广泛分布于非洲和中东。近几年，阿尔及利亚（1994）、罗马尼亚（1967—1997）、捷克（1997）、刚果（1998）、俄罗斯、美国（1999）都先后暴发过西尼罗河热[4]。在世界上许多国家和地区引起流行，造成人、马和鸟类的大量感染及死亡，给发病国家造成重大危害，成为全球兽医界和公共卫生部门的一大难题。我国目前还没有发现西尼罗河病毒，但存在传入的风险，因此建立快速、准确的检测方法对于我国预防该病毒的入侵具有重大意义。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌种 质粒DH5α购自大连宝生物公司，EII基因由上海生工合成并克隆到PUC59载体上。PGEM-T-easy载体购自Promega公司。

1.1.2 主要试剂 普通PCR试剂盒、RT-PCR试剂盒、DL2000均购自TaKaRa公司，胶回收试剂盒购自上海华舜公司，Riboprobe System-T7体外转录试剂盒购自Promega公司。……