β-连环蛋白和DNMT1在子宫内膜腺癌中表达的关系及意义
2011-08-21兰翀徐洪涛
兰翀,徐洪涛
(1.沈阳市妇婴医院妇科,沈阳 110011;2.中国医科大学基础医学院病理学教研室,沈阳 110001)
β-连环蛋白(β-catenin)既是细胞黏附分子,又是Wnt信号传导通路激活的的关键,它作为一种癌基因,与结直肠癌[1]、肺癌[2]、子宫内膜腺癌[3]等多种恶性肿瘤的发生、发展和侵袭转移关系密切。DNA甲基化是导致抑癌基因失活和肿瘤发生发展的重要表观遗传学因素。DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)的异常表达与结肠癌等多种恶性肿瘤的发生发展有关[4]。但目前有关DNMT1在子宫内膜腺癌中表达和作用的研究还很少[5],DNMT1与 β-catenin在子宫内膜腺癌中表达的关系和意义尚不清楚。为此,本研究采用免疫组化方法检测DNMT1与β-catenin在子宫内膜腺癌中的表达情况和相互关系,及其与子宫内膜腺癌临床病理因素的关系。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 病例与标本:86例子宫内膜腺癌组织和正常子宫内膜组织标本随机选自于中国医科大学附属第一医院病理科2007-2010年存档石蜡组织标本。患者平均年龄57.3岁(45~72岁),术前均未接受放化疗。根据WHO(2004年)女性生殖系统肿瘤分类标准分为子宫内膜样腺癌78例、浆液性腺癌4例、透明细胞癌4例,其中高分化52例、中分化20例、低分化14例。根据1988年国际妇产科协会(FIGO)子宫内膜腺癌分期标准,分为Ⅰa期10例,Ⅰb期44例,Ⅰc期28例,Ⅱ期2例,Ⅲ期2例。
1.1.2 试剂:鼠抗人DNMT1单克隆抗体(sc-70981)购自美国SANTA CRUZ生物技术公司,鼠抗人βcatenin单克隆抗体(610153)购自美国BD Transduction Laboratories,S-P超敏免疫组化试剂盒(KIT-9710)和DAB酶底物显色试剂盒(DAB-0031)均购自福州迈新生物技术公司。
1.2 方法
将石蜡包埋组织标本制成4 μm切片,经二甲苯脱蜡、梯度乙醇脱苯、水化后,进行免疫组化染色,按试剂说明书操作,DNMT1和β-catenin一抗稀释倍数均为1∶200,以PBS取代一抗作为阴性对照。……
