刘成武 李向党

犬排卵检测技术的研究

刘成武 李向党

犬的发情周期与很多动物不同，犬是单次发情动物，发情周期为6个月左右，即在一个发情周期内交配没有受孕，犬都将再经过6个月到达下一个发情周期才允许交配。因此，准确掌握犬排卵的时间尤为重要，只有正确地掌握母犬的排卵时间，才能做到适时配种，提高母犬的受孕率和繁殖力。

一、犬的卵泡发育、排卵机制

犬的卵巢是由卵巢囊包裹，排出的卵直接进入卵巢囊内，输卵管与卵巢囊相接，靠输卵管的运动而将卵子送到输卵管漏斗部。卵泡充血时是排卵开始，成熟卵泡的直径为6～7mm。犬的卵巢囊由长约8mm的腹腔口开口于腹腔，发情时输卵管伞充血、增厚，与卵巢囊相接处的部分长出腹腔口，安全遮住了卵巢囊腹腔口，使得排出的卵不致于落入腹腔中。犬的排卵发生于发情期初期，排卵时卵是初级卵母细胞，刚排出时尚未成熟，在输卵管内继续发育并进行第一次成熟分裂，放出第一极体而变为次级卵母细胞，此时才具有受精能力，这是犬不同于其他动物的特性。卵从卵巢排出，又经过第二次成熟分裂，分裂后，在输卵管与精子结合形成合子。犬的卵在排卵后保持4天的受精能力。要得到较高的受胎率，必须使卵子和精子在活力最强时相遇。

二、排卵检测方法

（一）阴道外观检测：犬处在发情期，生殖道会表现出规律性的变化。表现为阴唇肿胀，临近排卵时肿胀程度最高，而后逐渐消退；阴道的肌肉组织由紧张状态逐渐变成松弛状态，使阴道松软，阴腔逐渐变大，在排卵期变得最大，而后逐渐恢复正常；阴道壁和子宫内膜组织增生，阴道流出血样物质，开始时呈暗红或鲜红色，而后逐渐变淡，至排卵期时呈淡淡的粉红色或无色，之后逐渐消失。

（二）促黄体生成素(LH)测定法：LH是由α和β两个亚基组成的糖蛋白，含有219个氨基酸。LH的主要生理作用是：协同FSH发挥作用，促进卵泡成熟，粒膜增生，使卵泡内膜产生雌激素，并在与FSH达到一定比例时，导致排卵，对排卵起着主要作用。排卵前1天，LH的分泌出现高峰，通常根据LH的高峰值可以准确地判断出排卵时间。

（三）促卵泡素（FSH)测定法：FSH为一种由α和β两个亚基组成的糖蛋白，糖基是以N-糖苷键的方式分别连接在α和β两个亚基上。FSH的主要生理作用是：刺激卵泡的生长发育，卵泡生长至有腔卵泡时，FSH能够刺激它继续发育增大至接近成熟。FSH高峰出现的时间与LH出现的高峰时间相当，但LH的高峰明显高于FSH的高峰。

（四）雌激素(E2)测定法：母犬的产生部位主要是卵泡膜内层及胎盘，卵巢的间质细胞也能产生。E2主要生理作用是：刺激并维持母犬生殖道的发育。发情时E2的分泌将逐渐增多，排卵前到达高峰。

（五）孕酮测定法：在不发情期或发情前期，孕酮水平是非常低的。在促黄体激素增长之前，孕酮含量就已经开始上升了，而在LH峰值的时候，孕酮含量已经达到1.5～2.5 ng/ml，并且继续上升。孕酮升到3 ng/ml，该母犬处于排卵的第一天。排卵后黄体形成，分泌多量孕酮（黄体酮），比排卵前的孕酮明显增加。

（六）B超诊断法检测：B超检测排卵是比较安全的，具有经济、无创、直观性好、重复性强的优点，为临床提供了监测排卵的可靠方法。由于B超检测需要母犬积尿充盈膀胱，但是临床上犬不会大量积尿或者B超刺激后会马上排尿，为检测带来困难。阴道超声可以解决此问题，与腹部超声检查相比，母犬无需充盈膀胱就能直接观察到卵泡生长、成熟及排卵的特征，成为监测卵泡发育的重要手段。在发情的第8天开始每天给母犬进行B超监测1次，直至卵泡破裂排卵为止。成熟的卵泡呈圆形或椭圆形，直径达6～9 mm，卵泡内呈无回声暗区，亮度好，境界清晰，80%的成熟卵泡可以见到卵丘结构，卵泡周围出现透声环。排卵后卵泡消失或体积缩小，内部呈现光点，1～2天完全消失。

（七）阴道上皮细胞检测：阴道上皮的细胞学变化，是在母犬体内激素作用下产生的。采取阴道粘膜采片法，按其细胞涂片的形态学观察能更客观更准确地反映卵巢的活动，为选定母犬最佳适时交配期提供可靠依据。乏情期阴道上皮细胞数量少，细胞直径小，细胞核清楚；发情前期细胞学变化主要为出现大量的带核的表皮细胞，这一时期细胞直径变大，呈多角形，核呈空泡状；进入发情期，带核表皮细胞形态上发生角化，变成无核的角化鳞状细胞；发情后期细胞形态逐渐恢复，无核、角化细胞消失，细胞形态规则、核明显。

（八） 唾液检测：近年来发现，在雌激素的影响下，唾液中的蛋白质、氯化钠及水分的含量发生变化，唾液结晶随发情周期的变化而发生明显的规律性变化。发情期开始后，显微镜下唾液结晶的形状为典型羊齿状或松针状，主梗直而粗硬，分枝密而长，且排卵后2天结晶消失，表明唾液羊齿结晶出现及消失的时间比较集中，可预测排卵期。

繁殖是养犬业发展的基础，而较高的受孕率是繁殖的重要保障。只有正确地掌握母犬的排卵时期，才能做到适时配种，提高受孕率。在临床上应该阴道外观检查、阴道细胞学检查、B 超检查和激素检测方法结合起来，才能更准确地确定母犬的排卵时间。

（作者单位：公安部警犬技术学校，330100）

（编辑：李 冰）