唐年忠，吴生齐，杨立伟（.广东省食品药品监督管理局审评认证中心，广州市50080；.广东省药品检验所，广州市 5080）

茵苓祛湿汤为由金银花、茵陈、茯苓、栀子、布渣叶、木棉花、甘草、神曲等13味药材组成的临床验方，功效为祛湿化浊、清热消滞，临床主要用于气滞郁湿所致之湿热证。绿原酸为方中主药金银花与茵陈的指标性成分，具有抗病毒、抗菌消炎、清除自由基、降糖、降脂、保肝利胆等多种功效[1]。栀子中含有环烯醚萜苷类有效成分，包括栀子苷、京尼平苷、羟异栀子苷、栀子苷酸等，其中含量最高的是栀子苷和京尼平苷[2]，具有解热镇痛、镇静催眠、保肝利胆、抗炎杀菌、降压、防动脉粥样硬化、抗血栓、免疫抑制等作用[3]。本试验采用高效液相色谱（HPLC）法测定茵苓祛湿汤中绿原酸、栀子苷的含量[4，5]，以为该方剂的新药开发提供参考。

1 仪器与试药

HPLC仪，含SIL-20A自动进样器、LC-20AT四元梯度泵、SPD-20A紫外检测器、LC solution化学工作站（日本岛津公司）。

绿原酸、栀子苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号分别为110753-200413、0749-200007）；乙腈、甲醇为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯；茵苓祛湿汤（为拟开发成医院制剂的临床煎剂，批号：090203、090204、090205）；所用药材均为市售品，均经广州中医药大学中药学院张军教授鉴定为真品。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Kromasil C18（250 mm×4.6 mm，5µm）；流动相：乙腈-0.4%磷酸（13∶87）；流速：1.0 mL·min-1；双波长检测：绿原酸327 nm、栀子苷238 nm；柱温：室温；进样量：5µL。在上述色谱条件下，绿原酸、栀子苷分离度良好。色谱见图1。

图1 高效液相色谱图Fig 1 HPLC chromatograms

2.2 混合对照品溶液的制备

取绿原酸、栀子苷对照品各适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含绿原酸0.08 mg、栀子苷0.18 mg的混合溶液，即得。……