酵母多糖致全身炎症反应综合征大鼠模型的制备
2011-08-06陆麒羽周裕洋王俊波翁家侃
陆麒羽,周裕洋,王俊波,王 琳,孟 璐,翁家侃,余 波,全 胜
(浙江大学城市学院临床医学系,浙江杭州310015)
全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS)是感染或非感染因素作用于机体而引起的一种全身性炎症反应综合征。SIRS是常见的危重急症之一,并易发展成多脏器功能障碍综合征(Multiple organ dysfunction syndrome,MODS)甚至多脏器功能衰竭(Multiple Organ failure,MOF),病死率高达70%左右[1]。由于引起SIRS病因十分复杂以及确切的发病机制仍未完全明了,也缺乏理想的动物模型,因而对SIRS相关的实验往往无法得到良好的开展。
本实验通过酵母多糖-石蜡混悬液腹腔注射制作大鼠SIRS模型,力求制作与临床SIRS表现一致,又排除感染因素等外源性干扰因素,符合SIRS诊断标准的动物模型。
1 材料与方法
1.1 实验动物和分组 SD大鼠48只,5~7周龄,体重160~200 g,雌雄各半,由浙江大学医学院动物实验中心提供,恒温22℃室内饲养,正常光照时间8:00 a.m.-20:00 p.m.,无饮食饮水限制。动物实验操作时间为8:00 a.m.-16:00 p.m.。将SD大鼠随机分为正常对照组和模型实验组,模型实验组按不同浓度分为500 mg/kg、750 mg/kg、1 000 mg/kg组,每组12 只。
1.2 主要试剂和设备 酵母多糖(zymosan A)由SIGMA公司(z4250)提供;液体石蜡购自江西德成制药有限公司;TNF-α ELISA定量检测试剂盒由R&D公司提供,IL-6,IL-10 ELISA定量检测试剂盒由博士德生物有限公司提供。
1.3 动物实验 实验前18 h,SD大鼠开始禁食(不禁水),上午8时先称重、测直肠温度,将酵母多糖粉剂和液体石蜡混合,高频振荡15 min,然后在100℃水浴80 min灭菌,制成酵母多糖浓度为100 mg/ml的混悬液,用时以40℃水浴,高频振荡 15 min后以 500 mg/kg、750 mg/kg、1 000 mg/kg剂量分别对3组大鼠进行腹腔注射。对照组注射灭菌生理盐水。模型制……