祝 浩，龙子江，刘金林，孙 立，司文文，王舒舒

（安徽中医学院，安徽 合肥 230038）

冠心病指冠状动脉粥样硬化使血管腔狭窄或阻塞，或（和）因冠状动脉功能性改变（痉挛）导致心肌缺血缺氧或坏死而引起的心脏病，统称冠状动脉性心脏病，亦称缺血性心脏病，因而用活血化瘀药治疗冠心病已成为冠心病综合治疗的有效方法之一。

参精护心汤（主要组份：人参，三七，川芎等），其功效主要是理气开窍，活血化瘀止痛，用于气滞血瘀证候。本实验采用结扎冠脉左前降支的方法复制大鼠心肌缺血模型，观察参精护心汤对心肌缺血模型大鼠ECG－ST段动态变化及血清中NO、ET、LDH、CK含量的影响，探究参精护心汤对心肌缺血方面的防治作用及机制。

1 材料

1.1 药物与试剂

参精护心汤浸膏（比重为1g：1.087g）；复方丹参滴丸（由天津天士力制药股份有限公司生产，批准文号：国药准字Z10950111，批号：100205，人用量810mg／d）；2－3－5－三苯基氯化四氮唑（TTC，国药集团化学 试剂有限公司，批号F201006）；内皮素（ET）试剂盒（上海森雄科技实业有限公司，批号：201012168）、一氧化氮（NO）试剂盒、乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒、肌酸磷酸激酶（CK）试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号：20101005）。

1.2 实验动物

Wistar大鼠70只，雌雄各半，体重200～240g。由南京医科大学动物中心提供，许可证号SCXK（苏）2009－0001。

1.3 仪器

XD－7100型心电图机（上海医用电子仪器厂）；Anke TDL－5台式离心机（上海安亭科学仪器厂）；Multiskan MK2酶标仪（Labsystem）。

2 方法

2.1 模型复制及分组

取健康Wistar大鼠70只，体重在200～240g之间。用乙醚麻醉且固定后，接XD－7100型心电图机。测量各大鼠手术前ECG－ST段是否正常。左胸去毛并常规消毒后，于左侧第4肋间开胸暴露心脏，在左心耳和肺动脉圆锥的交界和心尖连线上，穿5－0手术线结扎，迅速将心脏恢复到胸腔，闭胸；假手术组只开胸，暴露心脏仅穿线不结扎。大鼠插肢体电极监测标准Ⅱ导心电图，测结扎后心电图。以ECG－ST段出现明显抬高为模型复制成功标志。术后连续3天ip青霉素钠8万U·d－1防治手术感染［1］。将造模后大鼠以术后ECG－ST抬高值为基准随机分成6组：动物分为假手术组、模型组（等容积蒸馏水）、阳性药物组（复方丹参滴丸 0.1458g·kg－1）、参精护心汤高、中、低剂量组（4.6836，2.3418，1.1709g·kg－1）。每组10只，雌雄各半。各组分别按剂量连续ig给药28d。

2.2 指标测定

用XD－7100型心电图机分别测量各组大鼠手术前、手术后即刻及1、3、7、14、21、28d给药30min后心电图，并在第28天末次给药30min后，用3.5%的水合氯醛10mL·kg－1麻醉大鼠，腹主动脉取血后取出各组大鼠心脏。血液以3500r·min－1离心10min，分离血清，按照剂盒操作方法，测定血清中NO、ET、LDH、CK的含量；心脏剖取后，用冰生理盐水清洗无残血，滤纸吸干，称重，去除心房及脂肪组织，将左心室横切成1～2mm厚的薄片，用1.5%的TTC染色剂于37℃水浴中染色10min左右，至梗死区出现明显白色后取出，滤纸吸干，分离白色梗死区，称重，计算心肌梗死率（心肌梗死率＝心肌梗死区重量g／全心重量g×100%）。

2.3 统计方法

使用SPSS 11.0统计软件进行统计分析处理。所有数据用（）表示，组间比较采用单因素方差分析。

3 结果

3.1 参精护心汤对心肌缺血模型大鼠ECG－ST段的影响

各冠脉结扎组术后即刻ECG－T段均呈现异常抬高，与假手术组比较具有显著性差异（P＜0.01），证明各模型复制成功；药物组与模型组比较ECG－T段均有明显下降趋势，用药7dECG－ST段降低尤为明显，其中参精护心汤高剂量组降低效果最为显著（P＜0.01），见图1。

图1 参精护心汤对心肌缺血模型大鼠ECG－ST段的影响

3.2 参精护心汤对心肌缺血模型大鼠心肌梗死率的影响

模型组与药物组大鼠心肌经TTC染色后心肌组织呈现为玫红色与白色（白色部分为梗死区）。假手术组因未进行冠脉结扎，梗死率为零；与模型组比较，参精护心汤低剂量组心肌梗死率显著降低（P＜0.05）；复方丹参滴丸组，参精护心汤高、中剂量组心肌梗死率均有极显著的降低（P＜0.01）。

表1 参精护心汤对心肌缺血模型大鼠心肌梗死率的影响（，n＝10）

表1 参精护心汤对心肌缺血模型大鼠心肌梗死率的影响（，n＝10）

注：与模型组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01。

组别 剂量（g·kg－1）全心重量（g）梗死区重量（g）梗死率（%）假手术组 ／1.11±0.07 0 0模型组 ／ 1.23±0.050.27±0.0826.02±5.5复方丹参滴丸 0.14581.13±0.060.14±0.05△△ 12.39±4.43△△参精护心汤 4.68361.12±0.070.13±0.05△△ 11.61±5.58△△2.34181.13±0.080.17±0.07△△ 15.04±4.31△△1.17091.14±0.070.19±0.08△ 16.67±2.95△

3.3 参精护心汤心肌缺血模型大鼠血清NO、ET、LDH、CK含量的影响

表2显示，与假手术组比较，模型组NO含量明显降低（P＜0.01），ET含量显著升高（P＜0.01）；与模型组比较，各给药组NO含量显著降低（P＜0.05），参精护心汤高剂量组血清NO含量显著高于复方丹参滴丸组（P＜0.01），血清中ET含量均降低（P＜0.05）。

表3显示，与假手术组比较，模型组LDH、CK含量显著升高（P＜0.01）；与模型组比较，参精护心汤高、中、低剂量组血清LDH降低尤其显著（P＜0.01）。

表2 参精护心汤对心肌缺血模型大鼠血清中NO、ET含量的影响（，n＝10）

表2 参精护心汤对心肌缺血模型大鼠血清中NO、ET含量的影响（，n＝10）

注：与假手术组比较，##P＜0.01；与模型组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01。

组别 剂量（g·kg－1） NO（μmol·L－1） ET（ng·L－1）15.38±0.85 18.33±3.77模型组 ／ 6.53±1.57﹟﹟ 30.46±2.68﹟﹟复方丹参滴丸 0.1458 10.47±1.17△△ 22.31±3.56△△参精护心汤 4.6836 13.49±1.28△△ 21.02±1.95△△2.3418 9.14±1.14△△ 24.36±2.82△△1.1709 8.97±2.44△ 26.05±3.62假手术组 ／△

表3 参精护心汤对心肌缺血模型大鼠血清中LDH、CK含量的影响（，n＝10）

表3 参精护心汤对心肌缺血模型大鼠血清中LDH、CK含量的影响（，n＝10）

注：与假手术组比较，##P＜0.01；与模型组比较△P＜0.05，△△P＜0.01。

组别 剂量（g·kg－1） LDH （U·L－1） CK（U·mL－1）3835.23±175.66 0.512±0.115模型组 ／ 5236.44±351.85﹟﹟ 1.012±0.120﹟﹟复方丹参滴丸 0.14584179.04±615.24△△ 0.574±0.457△△参精护心汤 4.68364292.25±268.39△△ 0.564±0.102△△2.34184660.49±273.03△△ 0.614±0.498△△1.17094869.56±170.89△△ 0.816±0.234假手术组 ／△

4 讨论

由于ECG－ST段异常性升高是心肌出现缺血性损伤在ECG上的最显著特征，用以作为本次研究试验中造模是否成功的判定标准。通过对各组大鼠术前及术后即刻，1，3，7，14，21，28dECG－ST段动态变化的观察，说明参精护心汤对心肌缺血模型大鼠ECG－ST段的抬高具有显著的抑制并降低的功效；经过TTC染色后计算得出心肌梗死率，从数据中可以得出参精护心汤高、中、低剂量组均能较好地保护心肌组织减少心肌缺血模型大鼠心肌梗死范围。

现代医学认为，内皮损伤、血小板聚集、冠脉痉挛是触发心肌缺血、血栓形成的发病因素。血管内皮分泌多种生物活性物质，其中最重要的是内皮源性舒张因子EDRF，其化学本质即NO，它具有极强的舒张血管作用，对血小板聚集和血栓形成有强烈的抑制作用，还可以稳定溶酶体膜、对抗氧自由基损伤和内皮源性收缩因子EDCF（其中的ET是目前所知最强的血管收缩剂）。内皮损伤后NO和ET间平衡失调，可直接影响有关酶的活性，导致血管舒缩功能紊乱，血管内皮受损及通透性改变。同时还会引起血液成分、血流变特性的变化，加剧心肌缺血性损伤［2］。心肌缺血缺氧，心肌组织严重损伤，各种酶被释放出来，其中血液中LDH、CK含量明显增加，其升高程度与心肌梗死程度相平行［3］。因此，血清NO、ET、LDH、CK水平是心肌损伤的灵敏性指标。本实验心肌缺血模型组大鼠血清中NO显著降低，ET、LDH、CK含量显著升高，说明心肌出现损伤。参精护心汤高、中、低各剂量组对于心肌缺血模型大鼠血清中NO含量的减少以及ET、LDH、CK含量的增加均具有显著的抑制作用，说明参精护心汤能有效纠正NO与ET的失衡，保护血管内皮细胞，清楚氧自由基加强心肌细胞的有氧代谢，减少心肌细胞变性从而降低心肌组织的损伤。

以上研究表明，参精护心汤对于心肌缺血模型大鼠具有促进缺血心肌功能恢复作用，对于心肌缺血模型大鼠起到很好的保护作用。

［1］李仪奎.中药药理实验方法学［M］.第2版.上海：上海科学技术出版社，2006：320.

［2］张秋雁，苏剑峰，邓冰湘，等.超微血府逐瘀汤对急性心肌缺血大鼠心肌梗死面积及血清NO－ET的影响［J］.中医药导报，2010，16（5）：111－112.

［3］吴红彦，王虎平，车敏，等.参参康心滴丸对实验性心肌缺血大鼠心电图ST段抬高动态变化及血清CK、LDH与血浆TXB2、6－Keto－PGF1α含量的影响［J］.中国中医基础医学杂志，2010，16（8）：665－667.